【摘 要】
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肾脏是机体内重要的代谢器官,不仅可以清除体内的代谢产物,而且还有内分泌功能,能够分泌激素参与生理功能的调节。根据已有的禁水、盐胁迫两种处理获得的转录组数据显示,肾脏在抗氧化调节中有抗氧化基因上调表达的趋势和存在非编码RNA参与的调节作用。本实验在细胞水平验证转录组数据揭示的抗氧化基因参与的抗氧化作用。首先将双峰驼的肾皮质和肾髓质细胞进行体外培养,之后对细胞进行高糖和高温的逆境模拟培养,最后对逆境培
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肾脏是机体内重要的代谢器官,不仅可以清除体内的代谢产物,而且还有内分泌功能,能够分泌激素参与生理功能的调节。根据已有的禁水、盐胁迫两种处理获得的转录组数据显示,肾脏在抗氧化调节中有抗氧化基因上调表达的趋势和存在非编码RNA参与的调节作用。本实验在细胞水平验证转录组数据揭示的抗氧化基因参与的抗氧化作用。首先将双峰驼的肾皮质和肾髓质细胞进行体外培养,之后对细胞进行高糖和高温的逆境模拟培养,最后对逆境培养下,细胞的抗氧化基因的表达进行检测。研究结果如下:1.高糖应激下,肾皮质细胞内ROS含量在5.5、10、15、25 mmol/L糖浓度下存在显著增加,肾髓质细胞内ROS含量在15、25、40 mmol/L糖浓度下存在显著增加;肾皮质细胞中基因CAT、SOD2、SOD3、Gpx1、Gpx3、SLC6A1、SLC14A1在10 mmol/L糖浓度下m RNA表达量差异极显著;Gpx1、Gpx3、Gpx4、GR、PEX5L、PCBP2、ACLY在40 mmol/L糖浓度下m RNA表达量差异极显著。肾髓质细胞中基因CAT、Gpx1、Gpx3在10 mmol/L糖浓度下m RNA表达量差异极显著;CAT、SOD1、Gpx1、Gpx3在40 mmol/L糖浓度下m RNA表达量差异极显著;SLC6A1在25 mmol/L糖浓度下m RNA表达量差异极显著。2.高温应激下,肾皮质细胞内ROS含量在40℃、42℃、45℃下显著增加,肾髓质细胞在42℃、45℃下显著增加;肾皮质细胞中基因SOD2在40℃、42℃、45℃下m RNA表达量差异极显著;SOD3在42℃、45℃下m RNA表达量差异极显著;Gpx1、Gpx3在45℃下m RNA表达量差异显著;Gpx4在40℃、42℃下m RNA表达量差异极显著;CAT在42℃、45℃下m RNA表达量差异极显著。肾髓质细胞中基因SOD1在40℃、42℃、45℃下m RNA表达量显著差异;SOD2和Gpx1在45℃下m RNA表达量差异极显著。根据细胞内ROS的检测结果以及抗氧化相关基因的差异表达,得知肾皮质细胞对糖浓度敏感,偏离血糖浓度值时,ROS含量都会增加,抗氧化基因以及抗氧化相关基因都会上调表达,产生OS;肾髓质细胞对糖浓度不敏感,只有在糖浓度极度偏离血糖浓度时,ROS才会增多,相应的抗氧化相关基因也会上调表达,产生OS。肾皮质细胞与肾髓质细胞对高温应激均很敏感,细胞内ROS在温度高于体内温度时均含量增加,抗氧化基因也随之上调表达,产生OS。
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