呼吸道白色假丝酵母菌生物膜的形成、结构形态及相关药物对其的影响研究

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目的:观察白色假丝酵母菌的体内外生物膜的形成、结构形态模型,并证明其强大的耐药性,并研究相关药物对生物膜作用的机理,探讨药物治疗呼吸道白色假丝酵母菌生物膜感染的可行性。方法:建立白色假丝酵母菌生物膜的体外模型,通过光镜、激光共聚焦显微镜观察体外生物被膜的结构及药物干预后的生物膜形态。利用扫描电镜观察大鼠体内生物膜模型。通过半定量RT-PCR方法测定相关药物干预后生物膜菌丝相蛋白(hwp1)表达变化情况。利用XTT减低法测定白色假丝酵母菌生物膜的代谢动力学并证明生物膜的耐药性,并了解相关药物对白色假丝酵母菌生物膜的干预情况。结果:①成功建立白色假丝酵母菌的体外生物膜,激光共聚焦显微镜下观察到酵母细胞沿着菌丝形成团块样聚集,生物膜生长成多层的膜状结构;阿司匹林没有明显抑制生物膜的菌丝,而氟康唑和姜黄油可以明显抑制生物被膜的菌丝形成。②证明白色假丝酵母菌生物膜具有强大的耐药性,阿司匹林和姜黄油各浓度对生物膜均有抑制作用,1mmol/l的阿司匹林对48小时后的生物膜无明显抑制作用,10%姜黄油对不同时间点生长的生物膜均有抑制作用;③扫描电镜下成功观察到大鼠体内导管内的生物膜呈菌丝相互交织成膜网状的空间结构;④药物干预下,阿司匹林组的hwp1蛋白未见明显抑制,氟康唑和姜黄油组的hwp1蛋白抑制明显,这与共聚焦显微镜观察到的结果一致。结论:呼吸道白色假丝酵母菌生物膜具有强大的耐药性,大鼠白色假丝酵母菌体内生物膜的形态得到证实,阿司匹林、姜黄油可能为今后治疗真菌生物膜的感染提供了实验的支持。
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