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理想的亲和膜应该具有良好的均一性,然而,现在大部分亲和膜所使用的基质膜材的孔隙率和孔径分布较宽,且膜厚不一,由于这些缺陷导致了亲和分离效率的大大降低。本课题从构建理想的亲和膜膜材入手,遴选具有有序孔排列、可控孔径和优良结构形态的无机膜—阳极氧化铝膜(AAO)为基质膜材,首次通过两种方法对其改性,获得有机无机复合和无机复合无机膜,使其满足亲和膜膜材的要求,并通过功能化的方法,偶联不同配基,制得新型亲和膜,并考察其形貌特征、亲和吸附性能、探索吸附机理及再生性能。主要研究内容如下:(一)膜材料的改性。本文选择AAO作为基质膜材,将具有良好生物相容性的生物大分子壳聚糖(CS)和无机物二氧化硅(SiO2)作为改性材料,分别通过化学偶联法和溶胶-凝胶法,复合于AAO膜中,获得有机无机复合膜(CS-AAO)和无机复合无机膜(SiO2-AAO)。通过活化,偶联配基后,分别获得了Cu2+螯合亲和膜和固载赖氨酸(Lys)亲和膜。通过SEM、TEM观察,所制备的复合膜,均一,平整,保留了空白AAO膜超均一的形貌结构。其中Cu2+螯合亲和膜上CS和Cu2+的固载量为49.7和27.15 mg/g膜;固载Lys亲和膜对Lys的固载量为5.57mg/g膜。(二)吸附影响因素的考察。将制备所得的Cu2+螯合亲和膜和固载赖氨酸(Lys)亲和膜,分别用于亲和分离血红蛋白(Hb)和胆红素(BR),并通过静态吸附和动态吸附两方面的影响因素对亲和膜的吸附性能进行系统考察,包括初始浓度、离子强度、pH值、温度、进样流速等。结果表明:(1)构建的CS-AAO和SiO2-AAO两种复合膜,均有效降低了AAO膜的非特异性吸附;(2)两种复合膜所制备的亲和膜均对其分离目标物展现了良好的吸附特异性,其吸附容量随着离子强度的增加而减少,随着温度的升高而有所增加;(3) Cu2+螯合亲和膜在pH值等于Hb等电点(pI=6.8)时,对Hb的吸附容量最大,随着pH值增大或减小,吸附容量均减少;(4)固载Lys的亲和膜对BR的吸附容量随着白蛋白浓度的增加而减少;(5)在膜堆积实验中发现,两种亲和膜的动态吸附容量均低于静态吸附容量,且随着流速的增加而降低。(三)吸附机理的推导。经过实验数据拟合,Cu2+螯合亲和膜对Hb的吸附符合Freundlich等温吸附机理,且R2=1;而固载Lys亲和膜对BR的吸附行为则属于Langmuir等温吸附机理,R2=0.9937,qmax=18.08 mg/g膜。(四)洗脱和再生性能考察。使用0.5 mol/L的咪唑对吸附Hb后的Cu2+螯合亲和膜进行洗脱,可以达到较大的洗脱率(91.2%),吸附—解吸过程重复5次后,亲和膜对Hb的吸附量仅减少6%;依次使用0.05 mol/L NaOH和白蛋白溶液对吸附BR的固载Lys亲和膜进行洗脱,可以达到95%的洗脱率,吸附—解吸过程重复5次后,Lys亲和膜对BR的吸附量仅减少6%。