肾癌混合多肽树突状细胞疫苗体外免疫活性的研究

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目的: 生物治疗在目前是肿瘤治疗的重要部分。开发出既能特异性识别并杀伤肿瘤细胞又不损伤正常细胞的免疫治疗将是一种颇受关注的肿瘤治疗新途径。激发机体的主动免疫来杀伤肿瘤细胞已成为免疫治疗的热点。本研究采用利用膜酸洗脱法获得人肾透明细胞癌786-0细胞膜表面人白细胞抗原(human leucocyte antigen, HLA)Ⅰ类结合特异性抗原多肽及其他多肽。体外诱导扩增单个核细胞成为成熟的树突状细胞(dendritic cell, DC)并负载酸洗抗原制备混合多肽树突状细胞疫苗,利用疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL),用51Cr释放法检测CTL的杀伤活性了解疫苗的生物学活性。 方法: 1.肾透明细胞癌786-0细胞株用250ml培养瓶培养,并用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养。把细胞分为两组,一组用含hIFN-γ2000u/ml的培养液,另一组不加hIFN-γ进行培养。 2.HLA表型分析:检测肾透明细胞癌786-0细胞的HLA基因型及筛选健康志愿者。用HLA引物试剂盒,琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)观察聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增后的DNA产物,鉴定肾透明细胞癌786-0细胞的HLA表型,实验中要寻找一个与肾透明细胞癌786-0细胞
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