鲤鱼,因其营养价值高,养殖成本低,易被人体消化吸收等优点而被广泛养殖。但在鲤鱼养殖过程中因水体污染,养殖密度过大等原因易造成鱼体污染、损伤从而致病致死,而抗生素的使用能够有效的预防和治疗鱼病。恩诺沙星是抗生素中最常见、抗菌作用较强、不易与其他抗生素产生交叉反应被广泛应用于水产养殖中。但不合理的使用或滥用抗生素易造成兽药残留,兽药残留可能对人体健康造成一定的潜在危害,严重可致癌、致畸、致突变。对恩诺沙星在鱼体内原药及其代谢物的研究及检测,既可以了解原药和代谢物残留情况,又可以为深入研究代谢物对环境和生态的影响提供理论基础,为改善水产养殖环境、及时进行病害防治、合理判断休药期等提供应用指导。达到预防或完全治疗水产疾病,又不过量使用抗生素的目的,保证环境安全、食用安全和出口内销过程的检测合格。本试验以鲤鱼为研究对象,首先对样品前处理进行优化,其次对高效液相色谱串联质谱条件进行优化,并利用优化好的方法,研究恩诺沙星在鲤鱼体内的代谢产物及代谢规律。研究结果如下:(1)确定最佳前处理方法:样品经无水硫酸钠涡旋混匀,酸化乙腈溶解后超声提取。溶液离心后上清液旋蒸至干。残渣用0.1%甲酸水和乙腈溶解,正己烷涡旋提取后静置分层,弃去上层液,取下层液过0.2μm滤膜。此方法操作简便,所用试剂少,耗时短,且在肌肉中的平均回收率为90.17%,肝脏中平均回收率为90.44%,肾脏中平均回收率为89.22%。(2)对液相色谱三重串联四级杆联用仪(LC-MS-MS)的洗脱程序、离子源、毛细管电压、碰撞能量等条件进行优化,得到最佳的液质条件:0.1%甲酸水溶液-乙腈作为流动相,0.2 mL/min流速,10μL进样量,梯度洗脱方式,质谱采用大气压电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式。结果表明:恩诺沙星在0.0050~3.000μg/mL范围内,线性关系良好,相关系数R~2=0.9995。最低检出限为0.0050μg/mL。(3)本试验所用鲤鱼均采用腹腔注射恩诺沙星的给药方式,采用液相色谱三重串联四级杆联用仪对鲤鱼肌肉、肝脏、肾脏中的恩诺沙星及其代谢产物进行鉴定,并对恩诺沙星及其代谢产物在不同时间下鲤鱼不同组织中代谢情况进行分析。经质谱分析可知:恩诺沙星的准分子离子为[M+H]~+m/z 360.200,并初步鉴定了4种代谢产物,分别为恩诺沙星去乙基代谢产物环丙沙星m/z 332.200、恩诺沙星脱羧代谢产物m/z 316.900、恩诺沙星去乙烯代谢产物m/z 334.000和恩诺沙星去水代谢产物m/z 342.200。(4)恩诺沙星进入鲤鱼体内后,大部分均以原药形式存在,小部分发生代谢,其主要代谢产物为环丙沙星,其次为恩诺沙星脱羧代谢产物。给药后鲤鱼肌肉、肝脏、肾脏中恩诺沙星浓度均迅速升高,药物浓度在鲤鱼体内达到峰值后开始呈现缓慢的下降趋势,此时肝脏和肾脏的药物浓度均高于肌肉的药物浓度。