实时定量PCR检测肾移植患者PBL细胞因子mRNA表达研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ksxy008
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目的 研究肾移植术后早期患者和CAN患者的免疫状态以及环孢素A效用,探讨TGF-β1与CAN和CsA之间的关系,对比ELISA检测肾移植患者外周血IL-2与实时荧光定量PCR检测PBL IL-2 mRNA表达结果的吻合性和准确性。 材料与方法 利用实时荧光定量PCR方法,检测32例肾移植(KT)患者术前、术后3、7、14、28 d外周血淋巴细胞(PML)有关细胞因子mRNA表达,对于1例DGF患者和2例AR患者附加发病后检测。对其中的20例CsA服用者,术后7d附加CsA服用后2h(C2)时间检测以及CsA空腹(CO)、C2浓度测定:利用双夹心抗体ELISA法测定术前、术后7d CO和C2时间外周血IL-2水平。同时取10例常规手术患者作为对照(OC),进行相应检测。选取15例CAN和22例非CAN患者,按CsA或MMF分组,行PBL有关细胞因子mRNA表达检测,同时测定其中的20例患者的外周血IL-2水平。 结果 KT组和OC组术前细胞因子mRNA表达无明显差异;KT组术后IL-10 mRNA表达高于OC组(P<0.05),而IL-2、IFN-γmRNA术后第7天的表达明显低于OC组。2例早期AR患者IL-2、IL-10、IFN-γ、TGF-β1mRNA表达于AR发生前后均增强,以IL-2 mRNA表达增强最为明显。术后7d,C2对应的IL-2、IFN-γmRNA抑制率分别为(69.47±7.09)%和(65.95±8.15)%;C2浓度与IL-2、IFN-γmRNA的抑制率有相关性,R~2分别为0.53和0.31,P分别<0.01和<0.05;CO与IL-2、IFN-γmRNA的抑制率无相关性。CAN组IL-2、IL-10 mRNA表达低于非CAN组,而IFN-γ、TGF-β1 mRNA表达明显高于非CAN组,P<0.01。csA组TGF-β1 mRNA表达高于FK506组,P<0.01;TGF-β1 mRNA表达与移植肾功能呈负相关,P<0.01。外周血IL-2水平与PBLIL-2 mRNA表达在术前和术后1~5年呈
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