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目的：研究miR-34b在儿童急性白血病中的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态，探讨其临床意义。同时检测miR-34b对细胞增殖是否有影响，进一步了解其生物学功能。方法：8种白血病细胞株（U937，HL-60，MV4-11，M2R，K562，Raji，CCRF，DAMI），儿童初诊急性白血病（AL）患儿骨髓标本87例，其中初诊急性淋巴细胞性白血病（ALL）患儿55例，初诊急性髓系白血病（AML)患儿32例，正常对照患儿43例。提取细胞株或其骨髓标本总RNA，并进行引物特异性逆转录成cDNA，运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术对miR-34b进行检测，循环阈值(Ct值)比较法进行miRNA表达定量分析。统计分析白血病细胞株、初诊AL、ALL、AML及MLL~+各组患儿miR-34b表达是否有差异，并根据临床资料进行进一步分析，以探讨miR-34b在儿童初诊AL、ALL及AML的意义。同时提取细胞株或其骨髓标本DNA，进行重亚硫酸氢钠修饰基因组DNA，运用甲基化特异性PCR（MSP）检测miR-34b启动子区CpG岛甲基化状态，并通过甲基转移酶抑制剂（5-aza-2-dC）处理HL-60及K562进一步检测其甲基化状态，结合临床资料进一步统计分析儿童初诊AL、ALL及AML与其甲基化状态是否相关。采用脂质体转染hsa-miR-34b mimics到K562细胞，通过流式细胞仪检测转染效率，CCK-8法检测细胞增殖情况。结果：1、miR-34b在正常对照、白血病细胞株、儿童初诊AL、ALL、AML及MLL+各组的相对表达量(x±s x)分别为5.22±1.15、0.03±0.03、1.18±0.47、1.65±0.69、0.18±0.06、0.64±0.34，与正常对照组相比，儿童初诊ALL组（P<0.05）、白血病细胞株组、初诊AL组、AML组及MLL~+组（P均<0.01）均有统计学差异。2、结合临床资料（如性别、年龄、免疫分型、染色体、融合基因、泼尼松实验等）做了进一步分析，发现miR-34b的相对表达量与儿童初诊ALL患儿泼尼松实验敏感与否相关（P<0.05）。3、miR-34b启动子在8种白血病细胞株中均出现甲基化现象，甲基化阳性率为100%，本实验共检测50例儿童初诊AL患儿，其中31例初诊ALL患儿，19例初诊AML患儿，其甲基化阳性率分别为64%（32/50）、77.42%（24/31）和42.11%（8/19），同时检测23例正常对照患儿，无一例出现甲基化现象。4、5-aza-2-dC处理白血病细胞株HL-60及K562后，miR-34b的相对表达量均明显升高，分别为49.5倍和18.8倍，其甲基化条带均明显减弱。5、结合临床资料（如性别、年龄、免疫分型、染色体、融合基因、泼尼松实验等）做了进一步分析，发现miR-34b的甲基化状态与儿童初诊AL患儿的免疫分型相关，淋系与髓系的miR-34b的甲基化状态之间具有统计学差异（P<0.05）。6、脂质体转染hsa-miR-34b mimics到K562细胞后，流式细胞仪检测转染效率为61%，CCK-8法检测各组细胞增殖情况，发现转染hsa-miR-34b mimics组48h、72h、96h及120h均出现细胞增殖抑制作用（P均<0.01），其中72h抑制作用最明显，抑制率达45.7%。结论：1、miR-34b在白血病细胞株、儿童初诊AL、ALL、AML及MLL+各组患儿中表达均明显减低，提示miR-34b可能作为新的抑癌基因参与儿童初诊AL、ALL及AML的形成，同时在MLL基因重排阳性儿童初诊AL的发病中可能起着重要作用，并影响其预后。2、miR-34b的相对表达量与儿童初诊ALL患儿泼尼松实验敏感与否相关，提示其是否可以作为判定儿童初诊ALL危险度及预后的指标。3、miR-34b启动子在白血病细胞株、儿童初诊AL、ALL及AML中均出现高度甲基化现象，提示miR-34b在白血病细胞株、儿童初诊AL、ALL及AML中均受甲基化机制调控，可能作为新的抑癌基因发挥作用。4、5-aza-2-dC处理白血病细胞株HL-60及K562后，miR-34b的相对表达量明显升高，甲基化条带明显减弱，进一步证实miR-34b在白血病细胞株中受甲基化机制调控。5、miR-34b的甲基化状态与儿童初诊AL患儿的免疫分型相关，提示miR-34b启动子在儿童初诊ALL患儿中甲基化频率高于儿童初诊AML患儿，miR-34b在儿童初诊ALL及AML中可能作为新的抑癌基因发挥作用。6、miR-34b对白血病细胞增殖具有抑制作用，提示miR-34b在白血病发病中可能发挥抑癌基因作用。