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目的:探讨蛋白精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)过表达对乳腺癌MCF7及MDA-MB-231细胞增殖的影响,并初步探讨其调控细胞周期蛋白D1(Cyclin D1,CCND1)的分子机制。方法:将真核表达载体pc DNA3.1/pc DNA3.1-PRMT2瞬时转染至MDA-MB-231细胞,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测CCND1蛋白的表达;构建PRMT2慢病毒载体,并在293T细胞内进行包装及病毒滴度测定后检测其表达能力;建立MCF7及MDA-MB-231稳定细胞株,显微镜观察四环素诱导前后细胞的变化,并通过MTT及克隆形成实验检测PRMT2过表达对乳腺癌细胞增殖的影响;Western Blot检测通路相关蛋白的表达,初步探讨PRMT2过表达影响乳腺癌细胞增殖的分子机制。结果:1.Western Blot结果显示PRMT2瞬时过表达明显下调CCND1的表达(p<0.05);2.成功构建了PRMT2 Tet-on慢病毒表达载体经测序及鉴定与基因序列完全一致,293T细胞内包装后获得病毒滴度为2.0×108 TU/ml,经四环素诱导后Western Blot检测到PRMT2-3Flag蛋白的表达;3.成功建立MCF7-PRMT2及MDA-MB-231-PRMT2稳定细胞株,经四环素诱导后Western Blot分别检测到PRMT2-3Flag蛋白的表达;4.MTT检测显示:四环素诱导组乳腺癌细胞增殖趋势明显减慢(p<0.05);5.克隆形成实验显示:四环素诱导组乳腺癌细胞增殖能力明显降低(p<0.05);6.Western Blot检测显示:PRMT2蛋白表达上调后p-Akt、p-GSK-3β、CCND1蛋白表达减少。结论:1.PRMT2过表达后抑制乳腺癌细胞的增殖。2.PRMT2抑制乳腺癌细胞增殖的机制可能与其调控p-Akt、p-GSK-3β及CCND1的表达相关。