【摘 要】
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目的:研究壮肝逐瘀煎对实验性大鼠肝纤维化的疗效及对TGF-β/Smad信号通路调节基因Smad4、Smad7表达的影响,进一步探讨壮肝逐瘀煎抗肝纤维化的作用机制。
方法:选用健康
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目的:研究壮肝逐瘀煎对实验性大鼠肝纤维化的疗效及对TGF-β/Smad信号通路调节基因Smad4、Smad7表达的影响,进一步探讨壮肝逐瘀煎抗肝纤维化的作用机制。
方法:选用健康清洁级Wistar大鼠120只,雌雄各半,体重220~250g,随机取16只作为正常对照组(A组)。剩余大鼠采用CCL4复合因素法进行肝纤维化造摸。给予大鼠高脂低蛋白食物(以玉米面为饲料,加0.5%胆固醇,实验第1、2W加20%猪油),10%酒精为唯一饮料,皮下注射CCL4(第1次注射100%CCL4油剂5ml/kg体重,以后每隔3天皮下注射40% CCL4油剂3ml/kg体重)。为了防止肝脏自然修复对实验结果的影响,各组于用药开始后仍每周注射40% CCL4油剂3ml/kg体重1次(A组除外)。于第4W末,随机处死造摸大鼠8只证实HF形成后做相关检测。将剩余96只造模大鼠随机分为病理模型组(B组)、壮肝逐瘀煎颗粒剂大剂量(成人20倍量)、中剂量(成人10倍量)、小剂章(成人5倍量)治疗组(C,D,E组)、秋水仙碱对照组(F组)、大黄蟅虫丸对照组(G组)共6组,每组16只。造模4W后各组分别予以灌胃给药,A组正常饲料喂养,灌胃与治疗组同容积的生理盐水;B组灌胃与治疗组同体积的生理盐水;C,D,E组给予壮肝逐瘀煎免煎颗粒剂,剂量分别为10g/kg体重、5g/kg体重、2.5g/kg体重;F组灌服秋水仙碱100μg/kg体重;G组灌服大黄蟅虫丸1.5g/kg体重。以上各组灌胃液体量为10ml/kg体重,均给药1次/天,其浓度及等效剂量按体表面积折算,共给药12W.A,B,C,D,E,F,G各组分别于用药治疗后6W,12W,禁食12h,随机选取8只大鼠称重后处死,剖取肝脏、并取肝脏右叶相同部位固定于10%甲醛中,石蜡包埋、切片,分别行HE,免疫组化染色。
结果:1.壮肝逐瘀煎能够明显减轻肝纤维化大鼠肝组织炎症活动及肝纤维化程度,具有较强的保肝、抗肝纤维化作用(P<0.01)。
2.免疫组化结果表明,模型组大鼠肝组织中Smad4表达明显增强、Smad7表达明显减少。壮肝逐瘀煎高剂量、中剂量组与模型组比较肝组织中Smad7的含量显著性升高(P<0.01)、Smad4的含量显著降低(P<0.01);经壮肝逐瘀煎治疗后的肝纤维化大鼠,肝组织结构改善,Smad4表达下调、Smad7表达上调,表明壮肝逐瘀煎对TGF-β/Smad信号通路具有一定的干预作用。
结论:壮肝逐瘀煎能够明显降低肝纤维化大鼠TGF-β/Smad信号传导通路中Smad4的表达,并且能够明显增加Smad7的表达,从而有效地阻断TGF-β/Smad通路的信号传导,这可能是其促使肝纤维化逆转的重要机制之一。
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