【目的】　　我们实验室的前期研究已从湛江红树林内生真菌拟茎点霉素（Phomopsis sp.)次级代谢产物中分离得到细胞松弛素H（cytochalasin H, CyH）单体，本文继续深入探讨CyH对肺癌血管生成的影响及其潜在的分子机制，为将CyH发展为抗肺癌血管生成的潜在药物提供科学依据。　　【方法】　　体外血管生成分析：分别用CyH（0μmol/L、0.78 μmol/L、1.56 μmol/L、3.13 μmol/L、6.25 μmol/L）处理A549 和H460肺癌细胞24 h，收集各处理组的条件培养液，将其与人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells， HUVECs）混合后接种到已聚合固化的 ECMatrixTM表面。以ECM 625 Matrigel作为基质检测CyH对肺癌细胞条件培养液诱导的HUVECs微管形成的影响。　　体内血管生成分析：分别用CyH（0μmol/L、6.25μmol/L、12.5μmol/L、25 μmol/L）处理 A549 和 H460 肺癌细胞24 h，收集各处理组的细胞及其条件培养液，与BD Matrigel Matrix混合后注射入裸鼠腋侧皮下。10 d 后，处死小鼠，剥离出Matrigel，拍照后迅速将 Matrigel 切成两份，一份用于免疫组织化学分析，一份用于血红蛋白的测定。　　分别用CyH（0μmol/L、6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L）处理A549和H460肺癌细胞16 h，收集细胞及其条件培养液。采用蛋白质印迹法（Western blotting）检测细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)、p-AKT、p-70S6K和p-ERK1/2的蛋白表达情况，RT-qPCR分析HIF-1α、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的mRNA 表达变化，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定各条件培养液中VEGF的蛋白浓度。　　【结果】　　1. 体外血管生成实验结果显示：溶剂对照组的条件培养液明显刺激了HUVECs的微管形成；当用CyH（0 μmol/L、0.78 μmol/L、1.56 μmol/L、3.13μmol/L、6.25μmol/L）处理A549和H460肺癌细胞后，HUVECs微管形成受到抑制，并且抑制作用随着CyH浓度的升高而增强，总管长度明显缩短（P<0.05）。　　2. 体内血管生成实验结果显示：与溶剂对照组相比，CyH（6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L）处理组的血管生成明显减少，且血红蛋白含量 (P<0.01)及HIF-1α和VEGF蛋白表达也明显降低。　　3. Western blotting结果显示：CyH抑制了HIF-1α蛋白的表达，并且抑制作用随着CyH浓度的升高而增强。同时，用CyH处理A549和H460细胞后，p-AKT、p-P70S6K、p-ERK1/2的蛋白表达被抑制, 并且抑制作用随着 CyH 浓度的升高而增强。　　4. RT-qPCR结果显示：CyH对A549和H460细胞中HIF-1α的mRNA 表达无明显影响。但是，CyH对A549和H460细胞中VEGF的mRNA 表达有明显的抑制作用(P<0.05)。　　5. ELISA 结果显示：CyH抑制了A549 和H460细胞VEGF蛋白的分泌，并具有浓度依赖性。12.5 μmol/L、25 μmol/L CyH处理组与溶剂对照组相比， VEGF的蛋白分泌差异具有显著性(P<0.01)。　　【结论】　　CyH 可抑制 A549 和 H460 肺癌体内外血管生成，其机制可能与抑制HIF-1α 蛋白表达、VEGF蛋白分泌和VEGF mRNA表达以及抑制PI3K/AKT/P70S6K和ERK1/2信号通路的激活有关。