本文旨在构建在线全二维制备正相液相色谱(NPLC)与反相液相色谱(RPLC)联用的系统与方法。针对在线正相液相色谱与反相液相色谱联用中流动相不兼容的问题，设计了全新的接口装置。该接口装置包括正相富集单元、反相富集单元以及连接二者的正反相切换单元，其中正相富集单元采用了新设计的气流辅助吸附(AAA)技术，可有效地除去正相液相色谱中的有机流动相，并将样品富集于正相（硅胶）富集柱上;正反相切换单元用于洗脱正相富集柱上的样品，并将其转移至下一单元，该部分还负责正相富集柱的再生;反相富集单元为流动相稀释-固相捕集接口，能将第一维正相富集柱的样品洗脱液进行稀释后，富集在反相富集柱上，并进一步将其送入反相液相色谱进行后续的制备分离。论文对接口各部分的工作参数进行系统的考察，通过该新设计的接口，成功实现了制备NPLC与RPLC的全二维在线联用。　　进而，以前胡醇提取物作为复杂混合物模型，考察所构建的在线NPLC×RPLC全二维制备液相系统的制备分离能力，最终从2g白花前胡的根的醇提取物中一次性分离得到19个高纯度化合物。该系统表现出了高效、快速的分离能力，能为复杂天然产物的分离提供正交性优秀的二维分离机制组合，是快速分离制备复杂天然产物成分的有效方法。