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神经恶性胶质细胞瘤是中枢神经系统(CNS)中最常发的恶性肿瘤,占据了70%以上的原发性CNS恶性肿瘤,并且以肿瘤切除术后复发率高、对化疗耐药耐、耐放疗、死亡率高为临床特征。虽然在近几十年的时间里,全世界医疗诊治技术水平发展十分迅速,颅内胶质瘤患者的治疗方案也逐渐个体化与精准化,但对于大多数患者来讲手术切除结合放化疗仍然是主流治疗方案。然而这种治疗方案的临床效果仍然不甚满意。所以挖掘与开发新的并且有效的胶质瘤治疗靶点成为了一项重要且急切的研究课题。Dna J热休克蛋白家族(Hsp40)成员C10(Dna J heat shock protein family member C10,DNAJC10)基因编码的蛋白ERdj5是真核细胞中内质网共伴侣蛋白,它是内质网相关降解复合体的重要组成部分,参与识别和降解细胞内错误折叠的蛋白质,减少了错误折叠的糖蛋白中不正确的二硫键结合。近年来许多肿瘤研究都表明热休克蛋白家族基因在肿瘤的发生发展过程中发挥了重要的作用,在多种癌症中都有发现热休克蛋白基因的异常表达,包括肺癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤等等。热休克蛋白基因作为应激性反应分子参与多种细胞内生理学过程以及通路,这些生理过程及通路对癌症的发生发展及临床进展十分重要。有研究结果发现,敲低DNAJC10表达后可削弱胶质瘤细胞和黑色素瘤细胞对内质网应激诱导剂毒胡萝卜内酯以及抗肿瘤药维A酰芬胺的抵抗性。但DNAJC10在胶质瘤恶性进展中的作用和其潜在机制尚不明确。前期已经有相关文献报道DNAJC10在细胞因子的外分泌及蛋白质降解复合体中发挥重要作用,而细胞因子的分泌及异常蛋白的降解是肿瘤细胞抵抗恶劣的微环境的重要功能部分,根据相关文献中的质谱结果发现,TGFβ是DNAJC10蛋白的重要底物之一,但DNAJC10是否通过调控TGFβ信号通路而在体内外促进胶质瘤的恶性进展,以及其详细的分子机制我们尚未明确。在此项研究当中,我们挖掘了TCGA、CGGA等大型胶质瘤数据库的转录组数据,明确了DNAJC10在各个级别的胶质瘤样本中的转录本表达水平,以及其与胶质瘤患者的总体预后的相关性。使用实时荧光定量PCR和蛋白质凝胶电泳实验检测DNAJC10蛋白质和m RNA在WHO II-IV级胶质瘤和正常对照脑组织的表达水平。为了研究DNAJC10对胶质瘤细胞恶性进展的作用,我们构建了敲低DNAJC10的慢病毒(sh-DNAJC10)及对照慢病毒(sh-Ctrl),以及DNAJC10分子中三位点突变(3*-CXXA-)慢病毒(OE-DNAJC10-4*-CXXA-flag),并在胶质瘤U87、LN229细胞系中进行转染,构建了稳定表达sh-DNAJC10的胶质瘤细胞系,并进行相应的表达量的验证。通过CCK-8法、单克隆细胞集落形成和Ed U实验分析来检测DNAJC10对U87、LN229胶质瘤细胞的增殖能力的作用,通过细胞划痕、Transwell侵袭实验检测DNAJC10对胶质瘤细胞的迁移及侵袭能力的影响。使用蛋白质免疫共沉淀技术检测DNAJC10与内源性TGFβ1的结合,并检测敲低DNAJC10后对TGFβ1的表达及分泌改变。通过外源性添加TGFβ1,进行回复验证DNAJC10敲低后,是通过下调TGFβ1通路影响胶质瘤细胞系的增殖、迁移及侵袭能力。并通过裸鼠颅内实验验证DNAJC10在异体种植瘤实验中的致癌作用以及其对带瘤裸鼠生存预后评估的价值。在本研究当中,我们揭示了DNAJC10在脑胶质瘤标本中高表达,且DNAJC10的高表达与胶质瘤患者的不良预后显著相关。我们发现了在脑胶质瘤细胞系中敲低DNAJC10后,胶质瘤细胞的增殖、迁移、及侵袭能力均显著受到抑制。并通过查阅文献发现TGFβ1可能是DNAJC10的底物蛋白,因此利用免疫共沉淀证明了DNAJC10与TGFβ1的结合,蛋白质免疫印迹实验及ELISA实验证明了敲低DNAJC10后,TGFβ1的蛋白质表达及分泌均受到抑制。我们推测DNAJC10可能通过TGFβ1通路影响胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力,回复实验表明,添加外源性TGFβ1后,DNAJC10敲低组的增殖、迁移及侵袭能力均能恢复到原有水平,这与我们所预测的结果相一致。此外,我们在裸鼠颅内成瘤实验和免疫组化实验中发现,DNAJC10敲低组的裸鼠生存时间显著延长,肿瘤增殖指标Ki-67的表达明显降低,TGFβ1的表达量也显著降低。本研究结果表明DNAJC10可通过调控TGFβ1通路,进而增强胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及体内生长的能力。因此我们认为DNAJC10可能是临床治疗胶质瘤的潜在靶点。