细胞趋化因子（Chemokines）是一些结构相关的炎症前期肽类，介导白细胞的迁移和激活。根据其中四个高度保守的半胱氨酸残基的相互位置关系，把细胞趋化因子分为四类亚族：CXC、CC、C、CX3C。CXC Chemokines是指四个丝氨酸残基中的前两个被一个氨基酸所分隔，包括IL-8（白细胞介素8）、GROα、GROβ、GROγ（生长相关癌基因）等，彼此间有25-90％的同源性，绝大多数都激活和趋化中性粒细胞，细胞趋化因子受体属于视紫红质G蛋白偶联受体超家族。有七个跨膜片段（STR），趋化物-STR-G蛋白通路是最明了的白细胞激活途径，相应于四类细胞趋化因子，有四类受体：CXCR，CCR，CX3CR和CR。 IL-8是1986年发现的一种中性粒细胞趋化因子。目前发现在适当的刺激下多种细胞均可合成和分泌IL-8。如单核细胞、T细胞、巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞和表皮细胞等，人类多种肿瘤细胞和细胞系均可高表达IL-8，其中甲状腺癌、黑素瘤、胶质细胞瘤、白第四军医大学硕土学位论文血病细胞等可稳定产生＊－8。 在中枢神经系统中，IL｛ 被发现存在于室旁核和海马区。IL七 在人正常垂体中无表达，在部分腺瘤（裸细胞腺瘤，促性腺细胞腺瘤）中有表达，其中大部分瘤细胞都呈阳性。本实验室用免疫组化发现，IL｛样免疫阳性物质稳定的存在于部分成年大鼠垂体前叶细胞中，主要是GH生长激素）细胞，少量为PRL（催乳素）细胞和ACTH（促肾上腺素）细胞，而少见与其它垂体前叶激素共存。垂体＊｛样免疫阳性物质在大鼠发育过程中会发生一定的变化，雌激素可以影响IL七样免疫阳性物质在垂体内的水平。 IL－8具有多种生物学活性，如趋化和激活中性粒细胞，并使其发生呼吸爆发、释放超氧化物和溶酶体酶及使细胞内钙离子浓度迅速短暂升高。IL－8可以作用于单核细胞，嗜碱性粒细胞，嗜酸性粒细胞，T淋巴细胞和内皮细胞的迁移和／或激活。IL－8还被发现是一种新的促进血管生成的因子。目前发现IL七与临床许多疾病的发生和治疗有密切的关系。 IL七的生物学作用是通过其相应受体介导完成的。ILE受体的命名有很多种，如AB a 0等1996年国际上统一命名为CXCRI和CXCRZ。所有受体都属于G蛋白偶联受体，能与L－8结合的受体除了L｛ 伯细胞介素8 A型受体XIL｛ 白细胞介素8 B型受体），还有 DARC（细胞趋化因子 Duffy抗原受体）和 saimiri疤疹病毒（HVS）编码的ECRF3R。 人 IL－SRA和IL－SRB基因者定位于染色体2q35，IL七RA与IL－SRB基困密切连锁和高度同源，可能是从同一祖先基因经复制而来。IL－SRA在氨基酸水平上与＊－SRB有78％同源性，IL－SRA高亲合力地特异性结合 IL－8，受体主要分布于中性粒细胞、单核细胞、T细 4第四军医大学硕士学位论文胞和黑素瘤细胞。IL－SRB 与L－8和其它趋化中性粒细胞的CXCChemokines有高亲合力。此型受体细胞来源比较小，主要分布于中性粒细胞和髓样细胞前体细胞系，如 HL60细胞系以及 THP上细胞和AMC 93细胞。 DARC是人红细胞Dllffi抗原馆pD），也是微小间日疟原虫受体。IL｛等趋化困子在红细胞上结合D ARARC后即失去了对靶细胞的作用。红细胞的这种清除作用意义在于维持一个合适的趋化因子浓度。 HVS是一种限定于灵长类的促 T淋巴细胞 Y疤疹病毒，它的开放性读框EC肝3的产物具有盯R基序，K以结合L七，称为EC肝3受体，是第一个病毒的盯R。ECRF3对＊E的敏感性比＊｛。J门 倍，但对 GRO a和 NAP－2的敏感性是L－SRB的 200倍。这提示 saimiri疤疹病毒感染的细胞具有对 GRO a和／或 NAP上（中性粒细胞激活肽 2）的跟感性，可以增强病毒的复制。 大鼠的几－SR也分为 A、B型，不同于人L－SRS有两型不同的基困，大鼠 IL七 仅存在单拷贝基困，两型受体有 65％的同源性。和人 IL－SRs的同源性约为70O，其中＊L－SRB和血L－SR有86O的同源性。rIL－slLkiTlrtriA为 1383 hp，蛋白由349氨基酸组成，rIL－SRBmRNA为1乃9 hP，蛋白由359氨基酸组成。ILE 在大鼠许多细胞（。中性粒细胞、巨噬细胞，嗜碱性粒细胞，单核细胞和B细胞）上均有丰富表达，在心脏，肝，脾，肺，肾和骨骼肌等组织中也有表达。而其在脑垂体组织中是否表达则未有报道。 洲究的目的在于从组织、细胞及分子水平上，探讨IL七 在大鼠脑垂体中的分布和表达。首先取新鲜垂体组织经 Bouins液固定后，常规石蜡包埋、切片及贴片。用兔抗大鼠＊8 多杭经免疫组化 5第四军医大学硕士学位论文ABC法染色，葡萄糖氧化酶－DAB－硫鞭锭法显色。实验中采用PBS代替一抗，作为空白对照。观察该受体在垂体中的分布。然后提取垂体组织和原代培养细胞的总RNA?