【摘 要】
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在中国传统白酒生产中,由于固态发酵不彻底,在酒糟中普遍含有10﹪以上的残余淀粉,而酒糟中的pH值低,此酸性条件下的淀粉利用就需要开发适合该生产条件的酸性α-淀粉酶.为此,该
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在中国传统白酒生产中,由于固态发酵不彻底,在酒糟中普遍含有10﹪以上的残余淀粉,而酒糟中的pH值低,此酸性条件下的淀粉利用就需要开发适合该生产条件的酸性α-淀粉酶.为此,该论文针对白酒生产中酒糟的利用问题,开展了酸性α-淀粉酶的研究工作.该文从淀粉厂的酸性土壤中分离得到一株产酸性α-淀粉酶的野生菌株YX.此菌株具有较高的产酶量,经生理生化研究,据《伯杰菌种鉴定手册》鉴定为Bacillus stearothermophilus.通过对培养基和培养条件的优化,最终摇瓶发酵产酶可达到83.67u/ml,比初始发酵培养基提高了3.3倍.基因工程技术的运用开辟了一条新的微生物育种途径,它打破了微生物的种间界限,将克隆化结构基因导入适当的新宿主中,使其表达.该文应用鸟枪克隆技术克隆了Bacillus stearothermophilus YX的酸性α-淀粉酶基因,从5000多个重组子中得到1株阳性克隆子.重组质粒经限制性内切酶HindⅢ酶切后电泳鉴定,得到插入DNA片段,大约为1.5kb.文中还采用了PCR技术进行目的基因的钓取,得到一个大约1.3kb左右的片段.在大肠杆菌中进行了1.5kb片段的初步表达,测定菌株发酵酶活为5U/ml.
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