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目的:1、观察不同浓度20（S）-人参皂苷Rg3干预不同时间对人肝癌细胞系SMMC-7721抑制率的影响;2、观察20（S）-人参皂苷Rg3干预对人肝癌细胞系SMMC-7721中p16启动子甲基化水平及p16INK4a蛋白表达的影响。方法:体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721,分为空白对照组和20（S）-人参皂苷Rg3干预组。20（S）-人参皂苷Rg3干预组予以40、80、160、320和640μM不同浓度20（S）-人参皂苷Rg3干预,分别在干预24h、48h和72h使用MTT法检测细胞抑制率,计算IC50,对结果进行统计分析,得到最佳药物干预浓度和干预时间。细胞划痕实验观察20（S）-人参皂苷Rg3对细胞迁移能力的影响。甲基化特异性PCR法检测20（S）-人参皂苷Rg3对人肝癌细胞系SMMC-7721中p16启动子甲基化水平的影响,蛋白质印记法检测人肝癌细胞系SMMC-7721中p16INK4a蛋白的表达水平。结果:1、在相同时间点,不同浓度20（S）-人参皂苷Rg3干预均可不同程度抑制SMMC-7721细胞存活,并呈剂量依赖性;2、在相同给药浓度下,20（S）-人参皂苷Rg3干预24h、48h和72h均可不同程度抑制SMMC-7721细胞存活,并呈时间依赖性;3、不同浓度20（S）-人参皂苷Rg3干预24h、48h和72h的IC50分别为236.4μM、161.2μM和132.7μM;4、20（S）-人参皂苷Rg3最佳干预浓度采用160μM,最佳干预时间采用48h;5、与空白对照组相比,20（S）-人参皂苷Rg3能够显著抑制SMMC-7721细胞的迁移增殖能力（p<0.05）。6、20（S）-人参皂苷Rg3干预能够降低SMMC-7721细胞p16启动子甲基化水平;7、20（S）-人参皂苷Rg3干预能够显著上调SMMC-7721细胞中p16INK4a蛋白的表达（p<0.05 vs.空白对照组）。结论:1、20（S）-人参皂苷Rg3能够明显抑制SMMC-7721细胞迁移增殖能力,发挥抗肝癌细胞的作用;2、20（S）-人参皂苷Rg3抗肝细胞癌的作用机制可能是通过降低p16启动子甲基化水平,从而上调其转录翻译蛋白产物p16INK4a蛋白的表达来实现的。