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研究目的: MUC1粘蛋白是一种高分子量、高糖基化的跨膜蛋白,在肿瘤组织中异常的高表达,并且与肿瘤的发生、发展和转移过程密切相关。MUC1作为重要的肿瘤生物学标志物,已成为肿瘤靶向治疗的研究热点。本实验拟从苹果渣中提取苹果多糖,以结肠癌细胞系SW-1116,HT-29以及小鼠结肠炎相关的结肠癌变模型为基础,观察苹果多糖对MUC1的影响及防治结肠炎癌变的作用,研究MUC1在结肠炎癌变过程中的变化,为其作为防治结肠炎癌变潜在的治疗靶点提供理论依据。研究方法:以苹果果渣为原料,采用水提醇沉、酸碱降解、透析和除蛋白法提取苹果多糖(AP);以DMEM培养液培养人结肠癌细胞株SW-1116,HT-29,分别给予0.5mg/mL、1mg/mL苹果多糖培养24、48h,收集细胞,提取蛋白,用Western-blot方法检测MUC1蛋白水平变化;采用致癌剂氧化偶氮甲烷(AOM)与致炎剂右旋葡聚糖苷钠(DSS)联合应用复制小鼠结肠炎相关的结肠癌模型。将150只五周龄雄性ICR小鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、3个给药组,每组30只。实验开始时正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射10mg/kg的氧化偶氮甲烷AOM。一周后,饮水中添加2.5%(W/V)右旋葡聚糖苷钠(DSS)饮水一周,间隔两周后,再次饮用2.5%(W/V)DSS水溶液一周。第七周时,在给药组小鼠饲料中加入含1.25%、2.5%、5%的苹果多糖,喂养小鼠至实验结束。在实验过程的第3,6,9,15,20周从正常和模型组及治疗组中随机选取处死小鼠,其余各组小鼠均在实验结束的第20周处死,收集小鼠肠道样本,用于HE染色、免疫组化及Western-blot方法检测,观察MUC1的变化及苹果多糖的作用。研究结果:通过对苹果多糖的提取纯化,得到糖含量在87.3%和分子量为50000-100000Da均一的苹果多糖;在细胞实验中,人结肠癌系SW-1116,HT-29细胞在给予苹果多糖后,MUC1粘蛋白的表达在24h、48h均表现为降低趋势,且48h后的MUC1粘蛋白表达明显低于对照组(P<0.05);AOM/DSS复制小鼠结肠炎癌变的模型,病理HE染色显示:在第20周时,模型组中全部小鼠肠道发生结肠腺癌和/或结肠腺瘤。给药组在不同程度上控制了结肠肿瘤的发生率,苹果多糖5%剂量组中明显减少肿瘤的发生,表现为苹果多糖对结肠炎发生癌变的防治作用。采用免疫组化、Western-blot方法测定结肠粘膜组织中MUC1的表达变化,在炎症急性期,粘膜组织中MUC1的表达与对照组比无显著性差异,而在炎症持续阶段及肿瘤形成后,MUC1呈现出高表达(P<0.01),给药组小鼠粘膜中MUC1的表达较模型组比呈现降低的趋势,而苹果多糖5%给药组中小鼠粘膜MUC1的表达水平较模型组比明显降低(P<0.01)。结论:1.苹果多糖可有效的防治ICR小鼠实验性结肠炎相关的结肠癌变的作用。2.MUC1粘蛋白在结肠炎症持续过程中呈现高表达,在肿瘤形成后其表达量异常增高,提示MUC1粘蛋白的变化与结肠炎癌变过程密切相关。3.苹果多糖可影响MUC1粘蛋白的变化,为苹果多糖防治结肠炎癌变机制提供一定的实验依据。