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核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是一种死体营养型植物病原真菌,可以侵染400多种植物,在世界范围内造成巨大的经济损失。侵染垫是核盘菌重要的侵染结构,在侵入寄主组织中起决定性作用,在与寄主互作过程中,核盘菌能够产生一系列的致病因子,草酸在破坏细胞结构,降低寄主抗性方面具有重要作用,是核盘菌的重要致病因子。在核盘菌中存在9个含有GATA锌指结构域的转录因子。其中,Ss Nsd1已有研究能够调控菌核、子囊盘、侵染垫的形成与发育,并对核盘菌精孢子的产生有负调控作用。Ss AMS2也是一个GATA转录因子,与裂殖酵母中的Ams2具有同源性,推断其在调控组蛋白基因转录起始中起重要作用。本研究克隆得到Ss Ams2基因的两个靶序列,并连接于RNAi载体p Silent-Dual上,将重组质粒转入核盘菌原生质体后对基因Ss Ams2进行沉默,得到沉默转化子,发现沉默转化子中Ss Ams2基因的表达量显著下降。进一步分析沉默转化子与野生型的表型差异,在核盘菌的生长发育方面,沉默转化子的菌丝生长速率变慢,菌核形成总重量降低,菌丝弯曲,分枝显直角,且分枝菌丝生长短小。同时发现沉默转化子的菌丝中细胞核数量减少。通过对组蛋白(H2A,H2B,H3,H4)及组蛋白H3变异体CENP-A编码基因的表达量分析,组蛋白基因均出现下调。对细胞周期调控蛋白Cdc6,Cdc28进行表达量分析,其表达量也出现下调。研究结果暗示Ss AMS2能够调控S期组蛋白基因的转录,影响细胞的分裂过程,从而调控核盘菌的生长过程。Ss Ams2被沉默后,在含过氧化氢平板上生长的核盘菌相对于野生型并未受到抑制,反而有抗性增强的趋势,推测Ss Ams2对过氧化物酶的产生有负调控作用。在抗高盐渗透胁迫环境下,野生型及沉默转化子的抑制效果无显著差异,证明Ss Ams2不参与调控高渗透抗性。此外,沉默转化子的侵染垫形成显著减少,草酸的产生量也明显减少。通过离体菜豆叶片接种实验,离体叶片的发病速度显著降低,进一步阐明Ss Ams2在核盘菌致病性方面具有重要调控作用。上述有关核盘菌转录因子基因Ss Ams2的功能研究,进一步加深了对核盘菌生长发育与致病机制的解析问题探索与解析,为菌核病的防治提供新理论与新思路。