miR-200b和p73、MDM2基因多态性与肺癌易感性的相关性研究

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肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,严重危害人类健康。文献表明,p73基因第二外显子G4C14-A4T14和MDM2基因SNP309多态性与肺癌易感性有密切关系,且miR-200b能通过调控通路影响p73及MDM2的表达。本文旨在研究湖南地区人群中p73、MDM2基因多态性及其联合作用以及miR-200b的定量表达与肺癌遗传易感性和临床病理学参数的相关性。主要研究内容如下:  (1)采用病例-对照法,收集168例肺癌患者和195例正常对照者的外周静脉血样,同时记录研究对象的基本资料和临床病理学参数资料。采用改良KI法在血样中提取DNA后,PCR-CTPP、HRM法以及DNA直接测序法分析p73基因多态性。结果表明,吸烟者在病例组和对照组中分别占69.6%和42.1%,两组有显著性差异(P=0.000;χ2=27.740),吸烟是湖南地区人群的肺癌高危因子(OR=3.161;95%CI=2.047-4.833)。p73 AT/AT基因型携带者的肺癌患病风险是GC/GC基因型的0.3倍(OR=0.323;95%CI=0.139-0.750)。p73基因G4C14-A4T14多态性与肺癌的临床病理学参数均无关联。  (2)采用病例-对照法,收集186例肺癌患者和196例正常对照者的外周静脉血样,同时记录研究对象的基本资料和临床病理学参数资料。采用改良KI法在血样中提取DNA后,PCR-RFLP、HRM法以及DNA直接测序法分析MDM2基因多态性。结果表明,吸烟者在病例组和对照组中分别占71.0%和41.3%,两组有显著性差异(P=0.000;χ2=33.991),吸烟是湖南地区人群的肺癌高危因素(OR=3.471;95%CI=2.268-5.311)。MDM2 TT基因型携带者的肺癌患病风险是MDM2 GG基因型的0.48倍(OR=0.476;95%CI=0.264-0.859)。同时携带p73 AT/AT基因型和MDM2 TT基因型的个体患肺癌风险约为携带其他基因型个体的0.13倍(OR=0.129;95%CI=0.129-0.587)。此外,p73基因G4C14-A4T14及MDM2基因SNP309多态性与肺癌的临床病理学参数均无关联。  (3)采用miRNA快速提取试剂盒在血样中提取小RNA,实时荧光定量PCR技术检测24例肺癌患者和12例正常对照者中血样中的miR-200b表达量。结果表明,病例组血样中的miR-200b含量明显低于对照组(P<0.01),及miR-200b异常表达与肺癌患者的各项临床病理学参数均无关联。miR-200b在p73 AT/AT基因型和MDM2 TT基因型中的表达量最低,但无显著相关性。受试者工作特征曲线(ROC)下的面积(AUC)约为0.868±0.087,表现为83.3%的敏感度和100%的特异性。  结论:p73 G4C14-A4T14、MDM2 SNP309多态性与肺癌的遗传易感性相关,并且两基因存在一定的联合作用。miR-200b在肺癌中低表达,血液miR-200b可能作为分子标记成为预测肺癌的生物标记物之一。
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