漆酶催化烯胺化、氧化偶联反应及漆酶固定化研究

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漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,主要以酚类化合物和芳香胺类化合物为底物,同时伴随分子氧还原成水。近年来,这种多酚氧化酶由于其底物广泛而得到化学研究者和生物研究者的普遍关注。众所周知,工业催化严重污染环境以及其苛刻的反应条件等缺点,使得漆酶这样一种清洁高效的氧化还原酶,在生物催化反应中占据了十分关键的地位,具有很重要的基础研究意义和巨大的商业价值。β-烯胺酮类化合物是重要的医药中间体,也是应用广泛的工业化合物,近年来,研究人员一直致力于研究出一种更简单,高效的合成方法,本论文提供一种绿色、高效的合成方法。即利用漆酶代替金属催化剂在去离子水中合成β-烯胺酮,同时进一步对漆酶参与的这类新型化学反应的机理进行研究。酶催化技术具有催化效率高、选择性好和反应条件温和等优点,但是游离酶不稳定,重复利用率差,价格昂贵,反应成本高等缺点极大程度上限制了漆酶的工业化应用,漆酶的固定化技术正是解决这些问题的有效方法。白藜芦醇及其衍生物在植物体内易发生自身偶联或异种单体之间偶联得到聚合度不等的天然低聚物,其中部分低聚物活性明显高于其单体本身,本论文将以SBA-15为载体制备的固定化漆酶应用到氧化偶联白藜芦醇及其衍生物的反应中,建立固定化漆酶氧化偶联白藜芦醇合成trans-δ-viniferins的反应体系,探讨并优化反应条件,对结果进行讨论。考虑到介孔材料表面物理化学性质对固定化酶的活力影响,本论文制备了一系列功能化离子液体修饰的介孔材料SBA-15,并应用于漆酶的固定化研究,本论文将漆酶固定化于这种新型材料上,并对这种新型载体对漆酶的影响进行了探讨和研究,进一步说明固定化酶的优点及特点。蛋白质的特定生理活性和功能在很大程度上由其构象决定,因此阐明蛋白质的分子机理以及构象引起了众多生命科学家的兴趣,通过傅里叶红外变换光谱(FT-IR)对漆酶在不同pH和不同溶剂下的测定,计算漆酶蛋白的二级结构中酰胺I带的α-螺旋,β-折叠及无规卷曲的百分含量变化,分析pH及溶剂种类通过对漆酶蛋白二级结构的改变影响漆酶的酶活的规律。
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