论文部分内容阅读
采用自乳化/溶剂挥发法制备了包载卡氮芥的聚乳酸纳米微粒(BCNU-PLANPs),扫描电子显微镜、透射电子显微镜、激光粒度仪等表征显示,纳米微粒呈表面光滑的球形,粒径较小且分布均匀,分散性好。制备工艺条件,如滴加方式、油相配比、聚乳酸浓度及乳化剂浓度等,对纳米微粒粒径及产率均有影响,在实验范围内最佳制备方法为:油相配比丙酮/乙醇:6:4、聚乳酸浓度为2%、乳化剂浓度为0.5%。采用显色法测定纳米微粒的载药率及包封率,考察了初始投药量、聚乳酸相对分子质量和挥发时间对微粒载药率和包封率的影响,纳米微粒的最高载药率和包封率分别为5.63%和33.45%。结合考虑纳米微粒的粒径、形态、产率、载药量及包封率,选择最佳制备方案为:初始投药比(BCNU/PLA)为1:5;聚乳酸相对分子质量为10 000,30 000和50 000;微球制备时间为5小时。载药纳米微粒的体外释药实验表明,聚乳酸纳米微粒具有药物缓释特性,且随聚乳酸相对分子质量减小,药物释放速度加快,突释现象明显。体外胶质瘤细胞抑制实验显示:空载微粒对肿瘤细胞没有抑制作用,显示出载体材料良好的生物相容性,载药纳米微粒对C6鼠胶质瘤细胞的抑制率等于或大于游离药物,且具有缓释抑制特性。以荷瘤鼠为模型的动物实验表明:无论是早期治疗还是晚期治疗,与对照组及原药治疗组相比,载药纳米微粒能有效的抑制胶质瘤细胞的增值,显示了较强的细胞毒性,显著提高了实验动物的生存期。尤其是在大剂量早期治疗中,一只荷瘤鼠肿瘤消失并长期存活,其余大鼠平均存活期为24.3天,存活期平均延长88.37%。另外,实验还证明空白微球有较好的体内生物相容性。在以上实验基础上,采用同种方法制备了表面修饰转铁蛋白的聚乳酸纳米微粒(Tf-PLA NPs),以X-光电子能谱对其表面结构进行了表征。荧光相差倒置显微镜观察显示纳米微粒表面的转铁蛋白具有活性,纳米微粒可进入细胞胞浆,具有瘤细胞靶向性。以99mTc放射性标记纳米微粒,SPECT观察不同途径给药后纳米微粒体内分布,结果显示:鼠尾静脉注射后纳米微粒主要浓集于腹腔的肝和脾;颈动脉注射后在腹腔脏器存在分布,颅内分布显著提高;立体定位注射后纳米微粒滞留于颅内,在外周器官未观察到放射活性。