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目的观察人脐带间充质干细胞来源的外泌体在细胞水平和临床治疗受损的人子宫内膜细胞的恢复潜力。方法1.脐带组织分离间充质干细胞,分别通过流式细胞仪检测人脐带间充质干细胞的特异性抗体,干细胞多项诱导分化实验鉴定干细胞的分化能力。无外泌体血清培养人脐带间充质干细胞,提取外泌体,通过电子显微镜和流式纳米分析仪鉴定人脐带间充质干细胞外泌体,免疫印迹法检测外泌体标记物的表达;2.分离子宫内膜组织中子宫内膜基质细胞,流式细胞术检测子宫内膜基质细胞的免疫表型,免疫组化鉴定波形蛋白和角蛋白在细胞的表达。3.将米非司酮诱导的损伤人子宫内膜基质细胞与人脐带间充质干细胞外泌体共培养,共聚焦显微镜检测人子宫内膜基质细胞在不同时间对PKH26标记的人脐带间充质干细胞外泌体摄取量。用流式细胞仪,CCK8等手段测量损伤人子宫内膜基质细胞的生长凋亡情况,用免疫印迹法对比抗凋亡因子及AKT信号通路的激活情况。结果1.分离的脐带间充质干细胞中CD73、CD90、CD105等阳性标志物均有较高的表达,阴性标记CD34、CD45、HLA-DR未表达。干细胞诱导分化实验证实人脐带间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞的分化潜能。WB结果证实人脐带间充质干细胞来源外泌体表达外泌体特异性标志物CD63、PDCD6IP和TSG101,而不表达自噬体标志物LC3A。流式纳米分析仪分析显示,平均直径为86.79±22.70 nm,人脐带间充质干细胞外泌体的浓度约为3.17×1011个颗粒/m L。2.分离出的人子宫内膜间质细胞特异标记分子CD34、CD44、CD90呈阳性,并且表达子宫内膜间质细胞特定蛋白波形蛋白和角蛋白。3.共聚焦显微镜显示受损人子宫内膜基质细胞对人脐带间充质干细胞外泌体的吸收率具有时间依赖性(0-20h之间).4.CCK8实验及细胞流式结果表明人脐带间充质细胞外泌体可促进损伤人子宫内膜基质细胞的增殖,降低米非司酮导致的子宫内膜基质细胞凋亡。5.人脐带间充质干细胞外泌体降低米非司酮损伤的人子宫内膜基质细胞的Cleaved Caspase-3的表达,,而增加Bcl-2的表达。外泌体可激活PTEN/AKT信号通路,调控增殖和凋亡,同时加入PTEN/AKT信号通路抑制剂减低了调控能力。结论人脐带间充质干细胞外泌体可修复米非司酮所致的人子宫内膜基质细胞损伤,外泌体通过PTEN/AKT通路,调控p-AKT水平,控制下游Bcl-2基因和Cleaved Caspase-3的表达。外泌体具有组织修复损伤能力,可能在损伤的子宫内膜修复中发挥积极作用,增加子宫内膜损伤患者子宫内膜的厚度及容受性。