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进行了大蒜愈伤组织的诱导以及高产超氧化物歧化酶(SOD)大蒜悬浮细胞系的筛选。在600 1x 12h循环光照条件下,采用0.5 cm×0.3cm×0.2cm大小、带表皮的广州白皮大蒜蒜瓣在MS+3.0 mg/L 2,4-D+1.2 mg/L 6-BA的优化培养基中可诱导出多量且较疏松的愈伤组织。筛选获得的大蒜高产SOD悬浮细胞系培养18天后生物量及SOD总酶活均达到最大值,分别为22.12g.DW/L和10.81×104U/L。 通过单因素变化考察了培养基中主要营养成分对悬浮培养大蒜细胞生长和SOD累积的影响。蔗糖是适合大蒜细胞悬浮培养的碳源,不仅有利于细胞生长,并有较高的SOD产量。在10~60g/L范围内,大蒜细胞生物量和SOD积累量在30g/L蔗糖浓度下达到最高。MS培养基的基本氮源已经足够满足大蒜细胞生长和SOD合成的需要。NH4+和NO3-作为无机氮源提供的离子较易被大蒜细胞吸收利用,尿素和酪蛋白水解物有助于大蒜细胞的生长。磷酸盐对大蒜细胞生长和SOD合成都是必需的。细胞在无磷培养基中不生长,不同起始PO43-浓度对SOD合成影响较大。1倍磷源浓度下大蒜细胞生长和SOD的合成最佳。 大蒜细胞生长过程呈现较典型的“S”型曲线。低浓度时蔗糖成为细胞生长的限制性基质:提高蔗糖浓度可明显促进细胞生长,但浓度超过30g/L后则表现出对生长的底物抑制作用。不同NH4+/NO3-比例对大蒜细胞生长的影响主要体现在高NH4+浓度对细胞生长的抑制作用。低浓度时磷酸盐成为大蒜细胞生长的限制性因素。提高磷酸盐浓度细胞生长周期缩短。在基准培养条件下,大蒜细胞的比生长速率约为0.22~0.26 day-1,倍增时间约为2.7~3.2天。 不同起始蔗糖浓度下SOD积累的趋势相似,在一定范围内,增加起始蔗糖浓度有利于SOD的合成,但在高糖浓度下,SOD总酶活下降。采用单一HN4+为氮源培养时SOD总酶活最低,其他氮源配比下SOD的总酶活均可达到一定的水平,当NH4+/NO3-为20∶40时,SOD总活力达到最大。初始磷酸盐的浓度对大蒜细胞SOD积累影响显著,1倍磷源浓度时SOD积累可达到最大值。 不同培养条件下,SOD的积累与大蒜细胞的生长呈相对密切的偶联关系,SOD的积累与大蒜细胞生长呈正相关。 大蒜细胞对培养基中蔗糖的利用采取先水解后吸收的方式,水解过程可以