两株锡尾矿真菌次生代谢产物研究

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一直以来,微生物都是药物先导化合物发现的重要源泉。特殊环境下的微生物更是具有开发潜力和研究价值的材料。经过多年对普通环境下真菌资源的大力开发,从中获得具有新结构,新功能的化合物的难度越来越大,因此科研工作者们已渐渐将目光转向寻找和开发极端环境下微生物的次生代谢产物。微生物的特殊环境是指在温度,湿度,酸碱度,压力,营养物质,重金属离子等条件与常态下有较大差异的外部环境,相比于普通环境,特殊环境有着更强的自然选择性,特殊环境中生长的微生物在代谢途径及代谢产物上都具有一定的特殊性,这为我们从中开发新型化合物带来了先天的优势。  本文选取云南个旧锡尾矿作为采集菌种的来源,该矿场采集到的土样含有浓度很高的重金属离子,是特殊环境中的一种,而在这一土壤环境中分离得到的微生物菌株具有特殊代谢途径及特殊代谢产物的几率较高。首先对这46株真菌进行液体发酵三瓶,作为初步筛选,经TLC(薄层色谱)点板分析,选出了4株代谢产物化学成分丰富的菌株。然后再把这4株真菌每株液体发酵10L,将发酵提取物通过正相硅胶柱层析、凝胶柱层析划段,并进行TLC点样分析,筛选出了可能产生新颖结构代谢产物的目标菌株YIM DT10092和YIMDT10086。YIM DT10092初步鉴定为曲霉属真菌,YIM DT10086初步鉴定为曲霉属真菌。之后对这两个菌株的发酵培养条件进行筛选,把其次生代谢产物的丰富和特殊程度作为依据,确定了发酵培养基的配方和发酵时间。最后进行放大发酵,YIM DT10092和YIM DT10086均发酵160L。得到发酵产物后,在TLC指导下,运用正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱制备等分离手段从YIM DT10092和YIM DT10086两个菌株的液体发酵产物中共分离鉴定了26个化合物,其中1个为新化合物:1,1-(oxybis(sulfanediyl))bis(3-meth-oxy-4-methylpent-4-ene-1,2-dione)(HC15);1个为新的核苷类衍生物(4S)-4-(6-methyl-9H-purin-9-yl)pentan-2-one(HC18);其余为3个核苷类衍生物:腺嘌呤(HC10),胸腺嘧啶(HC19),尿嘧啶(HC47);4个酰胺类衍生物: Nicotinamide(HC24),2-[(2-hydroxypropanoyl)amino]benzamide(HC38),2-(4-hydroxyphenyl)acetamide(HC44),N-(4-hydroxyphenethyl)acetamide(HC46);1个杂螺环γ内酰胺:Pseurotin A(HC36);2个吲哚类生物碱:Spirotryprostatins A(HC35),6-hydroxytryprostatin B(HC41);1个氧化吲哚类生物碱:Paraherquamide A(HC20);3个吡嗪类衍生物:2-Isopropyl-pyrazine(HC12),pyrazine-2,6-diyldimethanol(HC16),2,3,5-Trimethyl-pyrazine(HC27);1个核黄素类衍生物:Lumichrome(HC11);1个吩嗪类衍生物:3,6-Dihydroxy-1-phenazinecarboxylic acid(HC13);1个苯并呋喃类衍生物:7-methoxy-1,9-dimethyldibenzo[b,d] furan-3-ol(HC30);1个蒽醌类衍生物:1,8-dihydroxy-3-methylanthracene-9,10-dione(HC43);1个氧杂蒽酮类衍生物:1,7-dihydroxy-3-methyl-9H-xanthen-9-one(HC28);1个蒽环酮类衍生物:Resomycin C(HC31);2个甾醇类衍生物:3,5,6-trihydroxyergosta-7,22-diene(HC14), Ergosterol(HC40);1个混源萜类衍生物:Setosusin(HC33);1个醛类衍生物:2,3-dihydroxybenzaldehyde(HC9)。
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