花叶矢竹叶绿素生物合成关键基因PjPORB和PjCAO克隆与功能分析

来源 :浙江农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hghg2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
叶绿素(Chlorophyll,Chl)合成影响植物光合效率,是影响作物产量的重要因素。Chl生物合成途径(L-谷氨酰-tRNA→叶绿素a→叶绿素b)总共15步反应,涉及15种酶的参与,其中任何一个编码这些酶的基因发生突变都可能会引起叶片Chl的含量发生变化,从而表现为叶色异常甚至导致植株死亡。花叶矢竹(Pseudosasajaponica cv.Akebonosuji)叶色在生长发育过程中,呈现绿色、白色、绿白相间条纹(条纹的深浅、形状和出现个数和位置都具有不确定性),前期的叶绿素前体物质测定结果表明花叶矢竹叶色的异常可能与其叶绿素生物合成途径原叶绿素酸酯氧化还原酶(POR)和叶绿素酸酯a氧化酶(CAO)催化步骤的异常有关,本研究从这两个关键酶的编码基因PjPORB和PjCAO的分离入手开展了工作,主要结论如下:   1.通过RACE方法克隆到了花叶矢竹叶绿素生物合成途径中两个关键基因PjPORB和PjCAO的全长cDNA。PjPORB基因的cDNA全长1567 bp,含有一个1185bp的ORF区,编码394个氨基酸,包含SDR家族典型的Rossmann折叠NAD(P)结合位点和活性位点;PjCAO基因的cDNA全长2070 bp,含有一个1626 bp的ORF区,编码541个氨基酸,包含4个domain:前导肽序列,A domain,B domain和C domain,其中C domain含有一个典型的Rieske铁硫配位中心。   2.通过实时定量RT-PCR,分析了PjPORB和PjCAO在花叶矢竹根、茎和绿叶、白叶、花叶(绿条纹占叶面积大约70%以上的花叶和白条纹占叶面积大约70%以上花叶)的表达模式,结果显示PjPORB和PjCAO基因在花叶矢竹不同组织均有表达,在不同叶色叶片的发育过程中,PjPORB基因的mRNA水平呈现先升高后降低的趋势,PjCAO基因的mRNA水平呈现逐渐升高的趋势,并且表达程度各不相同,表明PjPORB和PjCAO基因可能通过影响叶绿素合成而在花叶矢竹叶片呈色过程中发挥了重要作用。   3.通过农杆菌介导的浸花法将构建好的植物表达载体pC1301-PjPORB和pC1301-PjCAO转化野生型拟南芥。潮霉素对种子的抗性筛选以及GUS染色、PCR和RT-PCR对再生植株的阳性鉴定表明PjPORB和PjCAO基因已成功转化拟南芥。对性状较稳定的T1代转基因植株的叶绿素含量测量结果表明,过表达PjPORB和PjCAO拟南芥植株的叶绿素含量较野生型高,说明PjPORB和PjCAO基因可能参与了拟南芥的叶绿素生物合成过程,加深了我们对植物(特别是竹类植物)叶绿素生物合成和光合作用过程的理解和认识。
其他文献
利用光纤传感器的特点,设计出一种新颖的颜色传感器,并对其进行 实验研究。对实验中元器件进行了详细的介绍,最后分析了实验中误差的主要来源 及减小误差的方案。 By using the
本文首先将自组织神经网络算法向一般化情形引伸,接着把自组织过程应用到一般非线性系统的动态过程分类,使得整个非线性系统能够按照输入输出样本空间的概率密度自组织,成为许多
该文首先提出一个通用故障示例模型,然后运用一种自适应神经网络学习算法来寻找差错属性与故障类型之间的对应关系,由此对故障进行诊断。因为网络的结构事先并不确定,而是在训练
崩岗是我国南方红壤所特有的一种水土流失现象,崩岗引发了大量水土流失,土地破坏,给国民经济和人民生命财产安全带来了极大损害。本试验在湖北省通城县杨垄和五里村选择2个发
在我国,随着人民生活水平的日益提高,人们越来越关注食品的安全问题.然而,作为食品专业技术人员,往往从科学技术的宏观角度出发认识食品的安全问题,会显得与众不同.因此,我仅
期刊
把现场总线 (FieldBus)技术应用在大型风电场微机监控系统中 ,提高风电场运行的可靠性 ,降低监控系统的造价。 Fieldbus (FieldBus) technology used in large-scale wind f
露地菊(Chrysanthemum×grandiflora)因花期长,花多而密,花色鲜艳,具有较强的抗逆性等特点成为近几年逐渐兴起的城市绿化地被植物。目前的研究主要集中在提高露地菊的园艺观赏性
随着园林绿化逐渐趋向于彩化,彩叶植物成为园林植物研究的重点之一。光照不仅影响彩叶植物叶片呈色,而且是植物光合作用的基础。因此在园林应用中,彩叶植物所适宜的光照条件是重
美国,俄罗斯,欧洲,在世界的政治、经济中有着举足轻重的作用,而三者之间的关系却始终很微妙,观念上的差异,对外政策上的不同价值取向,使三者之间的关系风云变幻.本期“环球焦