石油降解细菌的降解能力以及降解相关酶活性研究

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石油给人们带来了巨大的经济利益,然而也对环境造成了极大的威胁。目前石油污染已成为全球普遍关注的环境问题,国内外的研究人员都在积极寻找治理石油污染的有效途径。石油污染物进入环境后,多种因素同时制约着污染物的生物降解。微生物修复技术以其高效、经济和无二次污染等优点而被视为一项具有广阔前景的高新技术。本文对石油污染状况、石油污染物对土壤的危害、微生物修复技术以及国内外相关研究进展等方面进行了综述,着重对石油污染的微生物修复技术进行了阐述。利用实验室已分离的10个菌株进行了一系列试验,包括菌株在固、液培养条件下对石油的降解试验,石油组分降解前后的GC-MS分析,以及降解相关酶—脱氢酶、邻苯二酚2,3-双加氧酶和脂肪酶活性测定。主要研究结果如下:(1)将10个菌株在10g/L的石油液体培养基中摇瓶培养28天后,菌株X6的石油降解率最高,为54.35%。6个混合菌组合14天的石油降解率差异不大,在37.07-42.2%之间,降解率最高的为Y+Z组合。(2)10个菌株在添加1%石油的固体无机盐培养基平板上都能生长,说明各菌株都有一定的石油降解能力。菌株在土壤培养基中培养28天后,石油降解率均低于液体培养条件下的降解率,其中石油降解率最高的菌株为X6,达到50.13%,最低的是X7,为33.4%。(3)残油组分的GC-MS分析显示,降解前的石油中含有C11-C33的烷烃。各菌对C15-C19的直链烃有较好的降解效果。残油未降解组分主要为主碳链碳原子数24以上的烷烃。(4)酶活测定结果表明,10个菌株脱氢酶活性在3-371 mg.L-1.h-1(无诱导物)、10~501 mg.L-1.h-1(石油诱导),邻苯二酚2,3-双加氧酶(C230ase)活性范围在0.1332-0.4828(OD237),添加石油诱导提高了菌株C230ase活性,范围为0.5656-4.7380(OD237),同一培养条件下菌株细胞裂解液和培养液上清中C230ase活性有很大差异,表明C230ase为胞内酶。脂肪酶活性在38-135U之间。不同菌株之间酶活存在不同程度的差异,芽孢杆菌X1脱氢酶活性最高,芽孢杆菌X4 C230ase活性最高,根瘤菌Z的脂肪酶活性最高。液体、固体培养条件下的石油降解率与脱氢酶活性的正相关性都较为显著,脂肪酶活性与石油降解率、脱氢酶活性、C230ase活性之间都呈负相关。
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