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本文以产地为巴基斯坦的黑种草子（NSS-P）为原料,建立了其中总黄酮的含量测定方法,优化了总黄酮的提取条件,对提取出的总黄酮粗提物（NCF）进行分离纯化,并对不同纯度总黄酮的体外抗氧化活性进行了探究。主要内容如下:（1）以芦丁为化学对照品,比较了直接测定法、NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法、AlCl3法及AlCl3-HCl法的测定原理及试验结果,建立了一种适用于黑种草子总黄酮含量测定的AlCl3-HCl比色法。方法学考察结果表明,该方法精密度RSD值0.70%,重现性RSD值0.80%,平均加样回收率95.1%,RSD值1.61%。以所建立的方法对四种不同来源和种类的黑种草子进行了总黄酮含量测定,结果表明,该方法适用性良好。并以该方法比较了四种不同产地和类别的黑种草子中黄酮类成分的差异,选取总黄酮含量较高且更具研究价值的NSS-P为研究原料。（2）对NSS-P进行了基本成分分析,结果显示,其中含有水分5.41%,灰分4.49%,脂肪38.63%,蛋白质18.44%,多糖2.68%。通过单因素试验法和响应面分析法优化以超声辅助提取法提取NSS-P中总黄酮的最佳条件。最终确定的提取工艺为:甲醇浓度63%,液固比24:1（mL:g）,提取温度62℃,提取时间50 min,提取次数2次,在此条件下总黄酮得率为1.953‰。（3）按已确定的工艺条件对NSS-P中总黄酮进行提取,得纯度为0.82%的粗黄酮提取物NCF,以正丁醇萃取得到的总黄酮NTF纯度为1.76%;以聚酰胺树脂柱层析得到粗黄酮NTF-D组分,其纯度为54.25%;之后以葡聚糖凝胶LH-20柱层析对其进行分离和纯化,最终得到纯度为85.54%的总黄酮NTF-D1。NTF-D1进行LC-MS分析,检测出四种物质,初步推测其中三种分别为:（1）槲皮素-O-α-鼠李糖基-三糖苷,（2）黑种草黄酮苷（山奈酚3-O-α-L-鼠李糖（1→6）-β-D-吡喃半乳糖（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖苷）,和（3）黑种草苷（山奈酚3-O-β-D-吡喃半乳糖（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖苷）,其中化合物（3）为NTF-D1中主要成分。（4）采用四种体外抗氧化方法研究NTF、NTF-D、NTF-D1的体外抗氧化活性,以芦丁作为阳性对照,讨论了它们的总还原力及清除DPPH·自由基、·OH自由基和H2O2的能力。对于总还原力性能,总黄酮NTF-D1、NTF-D与NTF在浓度为50μg/m L时的吸光度分别为0.558,0.523和0.127;此外NTF-D1、NTF-D和阳性对照芦丁对于清除DPPH·的IC50分别为:46.24,62.32和52.82μg/m L;对清除·OH的IC50值分别为:120.06,143.84和113.94μg/m L;清除H2O2的IC50值分别是:0.299,0.426和0.393 mg/m L。不同纯度总黄酮的抗氧化能力从强到弱依次为NTF-D1、NTF-D、NTF,其中NTF-D1与NTF-D的抗氧化能力较强,特别是总黄酮纯度最高的NTF-D1与阳性对照芦丁的抗氧化能力接近;而NTF抗氧化能力在四个体系中普遍较弱。