【摘 要】
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BTB-ZF(Broad complex,tramtrack,and Bric a brac-zinc finger)转录因子家族对免疫细胞发育的谱系决定发挥了至关重要的作用。该家族的成员之一Zbtb1对T细胞发育非常重要,它也同时可以部分影响B细胞与NK细胞的发育。Zbtb1基因在BTB结构域上的一个点突变(即ScanT突变体),或Zbtb1基因的缺失都会导致小鼠T细胞几乎完全消失。IL-7是一
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BTB-ZF(Broad complex,tramtrack,and Bric a brac-zinc finger)转录因子家族对免疫细胞发育的谱系决定发挥了至关重要的作用。该家族的成员之一Zbtb1对T细胞发育非常重要,它也同时可以部分影响B细胞与NK细胞的发育。Zbtb1基因在BTB结构域上的一个点突变(即ScanT突变体),或Zbtb1基因的缺失都会导致小鼠T细胞几乎完全消失。IL-7是一个对维持胸腺细胞生存与T细胞正常发育至关重要的因子,其受体α链可以与Zbtb1基因在T细胞发育过程中相互作用。本研究的目的是探究Zbtb1基因在小鼠淋巴细胞发育分化过程中的作用,主要包括两部分:第一,Zbtb1基因促进小鼠淋巴细胞发育并抑制髓系细胞产生;第二,小鼠T细胞发育过程中Zbtb1基因与IL-7Rα相互作用的机制。现将研究内容总结如下:1.本研究以Zbtb1基因野生型和突变型(ScanT)小鼠为研究材料,采用流式细胞术和RT-qPCR等方法得出以下实验结果:Zbtb1野生型造血干细胞在OP9/OPDL1系统中可分化为淋巴细胞(B/T细胞),ScanT小鼠的造血干细胞在体外淋巴细胞诱导条件下,发育为髓系细胞;在体外髓系细胞诱导条件下将野生型造血干细胞(LSK)中过表达Zbtb1基因可抑制LSK向髓系细胞分化。综上得出,Zbtb1基因可以促进淋巴细胞发育,并抑制LSK向髓系细胞的分化。2.本研究以Zbtb1基因野生型和突变型(ScanT)小鼠为研究材料,明确Zbtb1缺失在小鼠T细胞发育过程中对IL-7Rα表达的影响。在体外和体内条件下阐明过表达Zbtb1对IL-7Rα表达的影响。研究结果表明在体外D1细胞系中,IL-7饥饿过夜后,Zbtb1的表达达到峰值,但在IL-7再刺激时,Zbtb1的表达在4h后达到最低水平;从D1细胞培养液中撤销IL-7饥饿过夜,再用不同浓度的IL-7进行再刺激,分析刺激后不同时间细胞表面IL-7Rα的水平得出Zbtb1过表达可在亚适宜IL-7浓度下调IL-7Rα的表达。动物实验中,我们将Zbtb1基因在hCD2-Zbtb1转基因小鼠D2系中过表达,在体内水平检测Zbtb1过表达在T细胞中对IL-7Rα表达的影响。综上得出,Zbtb1和IL-7Rα信号在T细胞发育过程中可以相互调节,相互抑制。
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