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目的：我们的研究采用低剂量的去甲基化药物5-氮杂胞苷（5-Azacytidine，5-Aza）对KYSE450食管癌细胞株进行表观治疗，随后检测DNA甲基化转移酶(DNAmethyltransferases，DNMTs）的表达与KYSE450食管癌细胞株生长状态改变情况。探讨低剂量的去甲基化药物5-Aza对KYSE450食管癌细胞株是否有效，以及DNMTs的表达与KYSE450食管癌细胞株生长状态之间的关系。方法：1.采用5-Aza不同的药物浓度处理KYSE450食管癌细胞株，使用蛋白印记杂交技术（Westernblotting）检测细胞中γH2AX蛋白表达，选取不产生细胞毒性的相对最大药物剂量用于后续实验的用药浓度。2.应用甲基化特异性PCR（MethylationSpecificPolymeraseChainReaction，MSP）检测用药前及用药后不同时间点DNMT1基因和DNMT3b基因启动子区域甲基化状态改变情况。3.应用Westernblot检测用药前及用药后不同时间点DNMT1基因和DNMT3b基因蛋白表达改变。4.应用实时荧光定量PCR（QuantitativeRealtimePolymeraseChainReaction,qRT-PCR)技术检测用药前及用药后不同时间点DNMT1基因和DNMT3b基因mRNA的表达改变。5.应用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期变化。结果：1.应用5-Aza处理KYSE450食管癌细胞72h后，测得1000nM/L的药物浓度为不产生药物毒性的相对最大剂量。2.KYSE450食管癌细胞在低剂量的5-Aza治疗后，DNMT1、DNMT3b基因甲基化降低，随时间的延长呈现先递减后递增的趋势。3.去甲基化作用能够增加DNMT1、DNMT3b基因的表达沉默，使该基因mRNA和蛋白表达减少，均出现先递减后递增的一致趋势，并且能导致细胞周期阻滞，抑制细胞的增殖。结论：1.低剂量的5-Aza对细胞不产生毒副作用，且能逆转DNMT1、DNMT3b甲基化状态，为临床长期进行表观遗传治疗提供依据。2.DNMT1、DNMT3b基因的mRNA、蛋白表达降低和细胞周期的阻滞与这两个基因启动子区的甲基化状态下降有着密切的关联。3. DNMT1、DNMT3b基因可能是食管癌发生、发展中的一个重要因素，为食管癌的分子靶向治疗提供新途径。