鹿血功效成分的分离与结构鉴定

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鹿血为鹿科动物梅花鹿或马鹿的膛血或茸血,因茸血量少,所以一般所说鹿血皆为膛血。其具有延缓衰老、提高免疫、抗疲劳等功效,是我国传统的滋补品,但目前对鹿血的化学成分与功效之间的关系还不明确,本文利用不同溶剂提取,先进行鹿血功能活性的初步研究,再利用多种色谱柱分离,得到鹿血中的七个化合物,结合核磁共振(NMR)及相关文献,对得到的化合物进行结构鉴定。利用乙醇、石油醚等溶剂经一定步骤提取、萃取得到相应的四种鹿血提取物。采用D-半乳糖制作衰老模型,比较对照组与实验组小鼠脑组织中单胺氧化酶(MAO)活力及肝组织中丙二醛(MDA)含量,结果显示,鹿血石油醚萃取物组、醇提物组与模型组相比,脑组织中MAO活力显著降低(P<0.05),肝组织中MDA含量极显著降低(P<0.01),而鹿血水提醇溶物组、水提醇沉物组与模型组相比,脑组织MAO活力与肝组织MDA含量均没有明显变化(P>0.05)。表明鹿血石油醚萃取物和醇提物能使小鼠肝组织中MDA含量和脑组织中MAO活力均显著下降,具有抗氧化、延缓衰老的作用。利用小鼠游泳实验比较鹿血提取物对实验组与对照组小鼠游泳时间的影响,结果显示,鹿血石油醚萃取物组的小鼠力竭游泳时间显著延长(P﹤0.05),抗疲劳能力明显高于对照组。结果表明,鹿血石油醚萃取物组的抗运动性疲劳的效果最好。提高免疫的实验通过比较鹿血提取物对实验组与模型组小鼠血清IgG(免疫球蛋白G)含量及小鼠脏器/体重比值的影响。鹿血醇提物组与模型组相比,小鼠血清IgG含量极显著增加(P﹤0.01),而鹿血水提醇溶物、石油醚萃取物和水提醇沉物组与模型组相比较,小鼠血清IgG含量都没显著性差异(P﹥0.05),表明鹿血醇提物组具有提高小鼠血清IgG含量的作用;鹿血醇提物组的小鼠脾脏和胸腺指数与模型组比较,差异均极显著(P﹤0.01),表明鹿血醇提物可使小鼠脾脏与胸腺指数增加。结果表明,鹿血醇提物对小鼠血清IgG含量,脾脏与胸腺指数都有一定的增加作用,可以一定程度提高机体的免疫能力。将得到的具有延缓衰老、抗疲劳及提高免疫活性的鹿血醇提物和石油醚萃取物合并上样MCI柱,分为A、B、C三部分,再各自用不同的色谱柱将其分离,结合NMR及相关文献,最后A部分得到的化合物为:(1)α-乙氧基-甘露糖;B部分得到三种主要化合物为:(2)次黄嘌呤核苷、(3)腺嘌呤核苷、(4)尿嘧啶;C部分得到的三种主要化合物为:(5)△4,14-雄烯-2醇-28,30环戊二烯庚酸酯-3酮、(6)△4,14-雄烯-2醇-27,29环戊二烯己醚-3酮、(7)△4,14-雄烯-2,19醇-28,30环戊二烯庚酸酯-3酮。
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