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本试验旨在研究柑橘黄酮对断奶仔猪生长性能、免疫性能、抗氧化功能、小肠黏膜形态、肠道相关蛋白和基因的表达及结肠微生物区系的影响,并评价柑橘黄酮在断奶仔猪上的最佳添加剂量与替代抗生素的效果。试验选取50头28日龄健康的杜×长×大断奶仔猪,随机分为5组:对照组饲喂基础日粮(CON组);抗生素组在基础日粮中添加75 mg/kg的金霉素(CTC组);3个试验组分别在基础日粮中添加了20、40、80 mg/kg柑橘黄酮(CF20、CF40、CF80组)。每组10个重复,每个重复1头猪,单栏饲养。试验期为28天。结果表明:(1)与对照组相比,CF40和CF80组显著提高断奶仔猪的末重、平均日增重和采食量(P<0.05),且CF40和CF80组显著降低了料肉比和腹泻指数(P<0.05)。(2)各组仔猪的器官指数无显著差异(P>0.05);与对照组相比,CTC、CF40和CF80组显著降低仔猪胃肠道的中十二指肠的pH(P<0.01)。(3)与对照组相比,柑橘黄酮能显著提高胃蛋白酶、空肠脂肪酶、回肠脂肪酶、空肠α-淀粉酶、回肠α-淀粉酶和胰蛋白酶的活力(P<0.05)。(4)与对照组相比,柑橘黄酮显著增加血清碱性磷酸酶活力(P<0.01),CF80组显著降低血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活力(P<0.01)并增加血清中的二胺氧化酶和生长激素(P<0.01),CF40和CF80显著降低血清中的D-乳酸和内毒素含量(P<0.01)和增加IGF-Ⅰ(P<0.01)及前列腺素E2的含量(P<0.05),CF40组显著增加了一氧化氮的含量(P<0.05)。(5)与对照组相比,柑橘黄酮显著提高血清中IgA、IgM和IgG含量(P<0.01)和增加血清中IL-4、IL-10和TGF-β含量(P<0.01)并降低血清中IL-2、IL-6、IL-8、IFN-γ和TNF-α含量(P<0.05)。(6)与对照组相比,CF40组显著增加了仔猪血清和肝脏中的T-AOC、T-SOD(P<0.05),但降低了MDA的含量(P<0.05);柑橘黄酮和CTC组增加了仔猪血清和肝脏中的CAT(P<0.05),CTC组增加了血清和肝脏中的GSH-Px(P<0.05)。(7)与对照组相比,CF80显著提高了十二指肠绒毛高度/隐窝深度的比值(V/C)(P<0.01);CF40和CF80组显著增加空肠V/C比值(P<0.01),且CF80的淋巴细胞的数量显著高于CTC组和CON组(P<0.01);CF80的显著增加回肠绒毛高度和杯状细胞数量(P<0.05),并增加V/C比值和淋巴细胞的数量(P<0.01)。(8)与对照组相比,柑橘黄酮显著提高肝脏中HO-1、NQO-1和Nrf2蛋白的相对表达量(P<0.05),柑橘黄酮和CTC组增加了仔猪肠道黏膜中HO-1、NQO-1、Nrf2和Occludin蛋白的相对表达量(P<0.05),但CF40和CF80组降低了NF-κB的相对表达量。(9)与对照组相比,柑橘黄酮增加了肠道紧密连接蛋白ZO-1和Occludin mRNA的相对表达量(P<0.05),提高了免疫因子IL-10 mRNA的相对表达量(P<0.05),降低了NF-ΚB、TLR2和TNF-αmRNA的相对表达量(P<0.05),增加了抗氧化蛋白基因Nrf2和抗氧化酶HO-1和NQO-1 mRNA的相对表达量(P<0.05)。(10)与对照组相比,柑橘黄酮和CTC组增加了仔猪结肠微生物OTU数量(P<0.05),且各组微生物群落的Alpha多样性指数(Chao1、ACE、Shannon、Simpson)不显著(P>0.05)。在门水平上各组仔猪结肠微生物的厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)无显著差异(P>0.05);与对照组相比,柑橘黄酮组和抗生素组能够显著降低仔猪蓝细菌门(Cyanobacteria)的相对丰度(P<0.05)。在科水平上,与对照组相比,CTC组、CF40组和CF80组显著降低S24-7和帕拉普氏菌科(Paraprevotellaceae)微生物菌群丰度(P<0.05)。在属水平上,与对照组先比,CTC、CF40和CF80组显著增加普雷沃氏菌属(Prevotella)(P<0.05),降低厌氧弧菌属(Anaerovibrio)、Prevotella和Ruminococcus菌属(P<0.05),且巨型球菌属(Megasphaera)在CTC组和CF80组中显著降低(P<0.05)。综上所述,日粮中添加柑橘黄酮提高了断奶仔猪的生长性能,降低断奶仔猪腹泻率,改善肠道健康,促进免疫和抗氧化能力,增强肠道屏障功能,并提高了结肠微生物区系的多样性和相对丰度,改善肠道微生物区系,有望作为抗生素的替代品,且柑橘黄酮添加量为80 mg/kg的效果最优。