弓形虫感染对小鼠疼痛行为影响的研究

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目的:刚地弓形虫是一种拥有广泛中间宿主的胞内寄生原虫。其生活史包括无性和有性生殖阶段。其中,有性生殖阶段必须在唯一的终末宿主猫科类动物的小肠上皮细胞内进行。有研究表明,弓形虫感染可以引起宿主出现一系列行为改变及神经精神疾病的发生,从而有利于其完成整个生活史过程。然而,弓形虫感染对宿主的疼痛行为影响的研究却鲜有报道。因此,本文拟进行弓形虫感染对小鼠疼痛行为影响的研究。方法:1.经口食入Prugniaud(Pru)株弓形虫包囊,建立Pru株弓形虫感染小鼠模型,观察小鼠发病情况以及进行病原学的检测。2.成功建立Pru株弓形虫感染小鼠模型后,分别测量Pru株弓形虫感染后0周、4周、8周和12周时小鼠的疼痛阈值。3.在完成疼痛阈值测量后,立即分别采集Pru株弓形虫感染后4周、8周和12周小鼠血清,并取小鼠脑组织制作脑组织匀浆液,镜下查找包囊,确定Pru株弓形虫感染成功后,再运用ELISA方法检测分析其血清中疼痛相关物质的含量变化。4.在完成疼痛阈值测量后,立即经心脏灌流固定Pru株弓形虫感染后8周小鼠脑组织,石蜡包埋制作脑组织切片,运用免疫组织化学的方法检测分析脑组织海马区内、皮质区内、下丘脑区内和杏仁核区内疼痛相关物质的含量变化。实验结果:1.Pru株弓形虫感染小鼠后第10天开始,小鼠出现一系列发病症状,如体重下降、眼部疾病、脾肿大、肝脏病变、腹水、弓背耸毛、萎靡不振、食欲减退,到第25天后症状开始减轻,提示成功地建立了Pru株弓形虫感染小鼠模型。2.Pru株弓形虫感染小鼠后0周、4周、8周和12周时小鼠的由机械刺激诱发的机械痛痛阈值和热刺激诱发的热痛痛阈值与正常对照组小鼠比较,痛阈值均显著升高。3.Pru株弓形虫感染小鼠后4周、8周和12周时小鼠血清中P物质(SP)、β-内啡肽(β-EP)和5-羟色胺(5-HT)的含量与正常对照组小鼠比较,无明显变化。4.与正常对照组小鼠比较,Pru株弓形虫感染后8周时小鼠脑组织海马区内SP和β-EP的含量均降低,而5-HT含量无明显变化;脑组织皮质区内SP含量下降和β-EP含量升高,而5-HT含量无明显变化;脑组织下丘脑区内SP、β-EP和5-HT含量均升高;脑组织杏仁核区内5-HT和β-EP的含量均升高,而SP含量无明显变化。结论:1.Pru株弓形虫感染小鼠后,感染小鼠出现一系列发病症状,提示我们成功地建立了Pru株弓形虫感染小鼠模型。2.Pru株弓形虫感染小鼠后0周、4周、8周和12周时小鼠由机械刺激诱发的机械痛痛阈值和热刺激诱发的热痛痛阈值均升高,提示,Pru株弓形虫感染影响了小鼠的疼痛行为,小鼠表现出对疼痛不敏感。3.Pru株弓形虫感染4周、8周和12周时小鼠血清中SP、β-EP和5-HT的含量与正常对照组小鼠比较,无明显变化。提示,Pru株弓形虫感染小鼠疼痛阈值升高可能与血清中SP、β-EP和5-HT的含量变化无关。4.Pru株弓形虫感染8周时小鼠脑组织海马区内SP和β-EP以及皮质区内SP含量均降低,同时下丘脑区内SP、5-HT和β-EP、皮质区内β-EP和杏仁核区内β-EP与5-HT含量均升高,由此我们推测:Pru株弓形虫感染小鼠疼痛阈值升高可能与调节脑组织海马区、皮质区、下丘脑区和杏仁核区内SP、β-EP和5-HT的含量有关。
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