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目的:贮袋炎是全结直肠切除、回肠贮袋肛管吻合术(Ileal pouch-anal anastomosis,IPAA)后常见并发症,在溃疡性结肠炎患者中发病率较高,显著降低患者术后生存质量,严重者甚至导致贮袋废弃、永久性回肠造口,而其发病机制尚不明确。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有多向分化潜能的非造血干细胞,能够通过多种机制进行自身的更新与分化,发挥炎症抑制作用,促进组织再生修复,已被广泛应用于多种疾病的治疗且疗效显著,但在贮袋炎领域未见相关研究。本课题通过葡聚糖硫酸钠(Dextran surfate sodium,DSS)干预IPAA术后大鼠建立稳定的贮袋炎模型,探究人脐带间充质干细胞对贮袋炎的干预效果并探讨其机制。方法:1.选取体重300~340g的清洁级雄性SD大鼠18只,随机分为DSS组、IPAA组和Sham组(n=6)。DSS组和IPAA组建立IPAA手术模型,DSS组术后31天起连续4天给予4%DSS自由饮用,IPAA组术后无特殊干预;Sham组行开关腹手术。记录术后大鼠体重、进食量、饮水量、粪便评分变化、血便情况、疾病活动指数评分(Disease activity index,DAI)。术后35d取Sham组末端回肠标本和余两组贮袋标本;HE染色进行组织病理学评分;免疫组化检测组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)表达水平;PCR和ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的mRNA和蛋白表达水平。2.MSCs由人脐带组织分离获得并在体外稳定培养,转染表达荧光蛋白的慢病毒以示踪干细胞腹腔注射后的动态分布情况。建立大鼠贮袋炎模型,随机分为MSC组、PBS组和DSS组(n=12),分别予:2×10~6 MSCs腹腔注射一次;1ml PBS腹腔注射一次;无特殊干预。记录各组大鼠体重及粪便评分变化、血便情况、DAI。于给药4天后处死每组6只,7天后处死其余6只。取贮袋标本进行组织病理学评分,MPO表达水平检测,IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-αmRNA和蛋白表达水平检测。结果:1.大鼠IPAA术后体重即开始下降,约第11天降至最低后逐渐上升,约术后第22天达到术前体重,进食量、饮水量恢复正常水平。术后第30天IPAA手术大鼠与Sham组粪便评分无统计学差异(P=0.718)。予DSS诱导后,实验大鼠呈现精神萎靡状态、体重下降、便血、粪便评分提高(P=0.002)。DSS组大鼠DAI较IPAA组和Sham组升高(P=0.003);肠壁粘膜溃疡、糜烂、绒毛结构破坏,组织病理学评分升高(P=0.004;P=0.003);MPO表达量升高(P<0.001);IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平升高(P<0.01);IL-10表达水平降低(P=0.004)。2.MSCs经腹腔注射后贮袋部位聚集明显,荧光显影于注射4天后消失。MSC组大鼠精神状态改善,体重逐渐上升,血便消失,粪便评分显著降低(D4:P=0.023;D7:P=0.020),肠壁充血糜烂消失,粘膜光滑完整,绒毛增长;而PBS组和DSS组大鼠体重在DSS停药5天后才缓慢增长,停药7天时粪便评分降低(P=0.020;P=0.023),绒毛破坏好转。MSCs治疗4天后大鼠DAI较其余两组降低(P=0.003;P=0.002);组织病理学评分降低(P=0.002;P=0.003);MPO蛋白表达量降低(P=0.004;P=0.004);IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA和蛋白表达量降低(P<0.01);IL-10 mRNA和蛋白水平显著升高(P=0.004)。MSCs治疗7天后大鼠DAI较其余两组降低(P=0.018;P=0.018);组织病理学评分降低(P=0.002;P=0.003);MPO蛋白表达量降低(P=0.004);IL-6的mRNA和蛋白表达量降低(P<0.01);IL-10的mRNA和蛋白水平升高(P=0.004)。结论:1.稳定建立大鼠IPAA术后实验性回肠贮袋炎模型,可用于后续实验研究。2.腹腔注射MSCs对DSS诱导的回肠贮袋炎具有治疗作用。3.MSCs对回肠贮袋炎的治疗作用可能是通过下调促炎因子的表达水平和上调抑炎因子的表达水平从而减轻炎症损伤的。