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目的:通过非酒精性脂肪性肝病小鼠模型观察负调控信号通路TLR4-TRIF-IFN-β和负调控分子IL-1RA在NAFLD发生发展中的变化,探讨负调控通路TLR4-TRIF-IFNβ和负调控分子IL-1RA在NASH进展中的作用。方法:10周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组和模型组,分别给予标准饮食和蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食。喂养1周、4周、8周后处死,称量体质量和肝湿质量计算肝指数;检测血清ALT、AST和IL-1RA水平;油红“O”染色、HE染色观察肝脏组织病理改变;免疫组化观察肝脏Kupffer细胞浸润情况;实时荧光定量PCR检测肝组织TLR4、TRIF、IFNβ、F4/80、MCP-1、TNF-α、和IL-1RA m RNA表达量;在1周、4周、8周末,分离小鼠肝脏原代kupffer细胞后培养并检测IL-1RA m RNA表达量。结果:(1)4周末和8周末模型组小鼠肝指数较对照组升高(P<0.05)。随着喂养时间延长,模型组小鼠肝指数呈上升趋势。与对照组相比,1周、4周、8周模型组小鼠的血清ALT、AST和IL-1RA水平均明显升高(P<0.01、P<0.05、P<0.05),模型组小鼠血清IL-1RA水平随着喂养时间延长逐渐降低,8周末最低。(2)模型组小鼠1周末时可见脂肪小泡,4周末时可见大小不等的脂肪空泡,少量气球样变和炎症灶,8周末时脂肪变性、气球样变肝细胞数和炎症灶数目增多,部分小鼠肝脏可见细胞外基质增生和窦周纤维化。(3)1、4、8周模型组小鼠肝脏F4/80、MCP-1和TNF-αm RNA表达量均较对照组明显升高(P<0.05、P<0.05、P<0.05),模型组小鼠MCP-1和TNF-αm RNA表达量随着喂养时间延长,呈上升趋势;免疫组化可见各周次模型组小鼠肝脏Kupffer细胞浸润。(4)1、4、8周模型组小鼠肝脏TLR4 m RNA表达量均较对照组明显升高(P<0.05),且表达量随着喂养时间延长,呈上升趋势;肝脏TRIF m RNA表达量在1周时模型组较对照组升高,8周末时降低。模型组小鼠肝脏IFN-βm RNA和IL-1RA m RNA表达量1周末、4周末时较对照组升高(P<0.05),IFN-βm RNA随着喂养时间延长,呈先上升后下降的趋势,4周末时达高峰;IL-1RA m RNA 1周末时表达量最高,随着时间延长表达量逐渐降低。模型组小鼠肝脏原代Kupffer细胞IL-1RA m RNA表达量则在1周末时开始升高,4周末达到高峰,8周末时降低,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论:NAFLD疾病进展过程中可能存在负调控信号通路TLR4-TRIF-IFNβ激活不足和负调控分子IL-1RA分泌不足的现象,促进了NASH进展。