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目的1.观察氟苯哒唑（FLU）对（QBC939和RBE）细胞活性、克隆增殖能力、迁移能力、侵袭能力、细胞周期的影响及促凋亡作用;2.探讨FLU对（QBC939和RBE）细胞周期的影响是否与抑制Cyclin B1和促进p53蛋白的表达有关;3.探讨FLU对（QBC939和RBE）促细胞凋亡的作用是否涉及Bcl-2/caspase信号通路途径。方法1.将人胆管癌细胞（QBC939和RBE）常规传代培养,通过CCK8实验检测不同浓度FLU对细胞活性的影响后,确定阴性对照组（Control）和药物实验组（低浓度0.25μM、高浓度0.5μM）。2.通过克隆增殖实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell实验检测细胞侵袭能力。3.通过流式细胞（BD FACSCalibur）检测QBC939和RBE细胞G1,S,G2期细胞百分率;使用Annexin V-FITC/PI染色后通过流式细胞检测细胞凋亡率;4.通过western blotting检测Cyclin B1、p53蛋白的表达;同时检测Bcl-2/caspase信号通路途径的表达。结果1.CCK8实验结果显示,氟苯哒唑（FLU）能明显降低QBC939和RBE细胞系的细胞活性;2.集落形成实验菌落计数结果显示,FLU处理组（0.25μm和0.5μm）QBC939和RBE细胞系的克隆数均较空白对照组均有明显减少,其差异均有统计学意义（P<0.01）,且浓度越高,克隆数越少;3.划痕实验结果显示,FLU处理组（0.25μm和0.5μm）QBC939和RBE细胞系迁移率显著低于对照组（P<0.01）,且浓度越高,迁移速度越慢;4.Transwell实验结果显示,FLU处理组（0.25μm和0.5μm）QBC939和RBE细胞系均与对照组之间的穿膜计数均有明显差异（P<0.01）,且浓度增加,穿膜细胞数量减少;5.流式细胞检测细胞周期结果显示,FLU处理组（0.25μm和0.5μm）QBC939和RBE细胞大量集聚在G2/M期,G2/M期细胞百分率分别由12.71±0.72、12.00±0.08分别增加至82.75±3.53、79.66±0.29,其统计学有明显差异（P<0.01）,且浓度越高,G2/M百分率越高;6.使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒染色后通过流式细胞检测结果小时,FLU处理组（0.25μm和0.5μm）QBC939和RBE细胞的凋亡率均显著高于载体对照组（P<0.01）,凋亡百分率分别由1.34±0.12、1.21±0.05增加至7.33±0.33、3.44±0.23,且浓度越高,凋亡率越高;7.western blotting结果发现,FLU显著下调QBC939和RBE细胞的Cyclin B1蛋白表达;FLU显著上调p53蛋白表达;8.western blotting结果显示,发现Bcl-2出现表达下调,进一步检测其下游凋亡基因caspase-3、caspase-9的蛋白出现表达增强。结论氟苯哒唑（FLU）对胆管癌细胞的活性、增殖能力、侵袭能力、迁移能力有抑制作用,促进细胞凋亡;与抑制细胞周期蛋白Cyclin B1、同时增强p53的表达有关,同时涉及Bcl-2/caspase信号通路,促使细胞凋亡。