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目的:分析2018年苏州地区手足口病的病原构成,探索不同病原所致手足口病的临床特征。方法:1.收集2018年5-7月在苏州大学附属儿童医院住院手足口病患儿的咽拭子336份,采用半巢式逆转录聚合酶链反应(Semi-nested reverse transcription polymerase chain reaction,半巢式RT-PCR)进行多病原分析,并将检测为柯萨奇B5型(coxsackievirus B5,CVB5)阳性的病毒液30例接种于A549细胞,观察细胞病变,进一步验证半巢式RT-PCR结果。2.收集2017-2018年住院手足口病病例338例的临床资料,分为三组,其中肠道病毒71型组(E组)133例,柯萨奇病毒A16型组(A组)99例,柯萨奇病毒B5型组(B组)106例,另收集与三组性别、年龄匹配的同期健康体检儿童45例为对照组(C组)。回顾性分析三组患儿的病历资料和外周血血常规及CRP、肝肾功能、心肌酶谱以及体液、细胞免疫功能等检查结果,并与对照组比较,寻找统计学差异。结果:1.336例手足口病咽拭子标本中共检出阳性标本218例,总阳性率64.88%。其中,CVB5 阳性 121 例(36.01%),柯萨奇病毒 A6 型(coxsackievirus A6,CVA6)阳性 36 例(10.71%),柯萨奇病毒 A10 型(coxsackievirus A10,CVA10)阳性 12 例(3.57%),柯萨奇病毒 A16 型(coxsackievirus A16,CVA16)阳性 10 例(2.98%),肠道病毒 71 型(Enterovirus 71,EV71)阳性 2 例(0.60%),CVA16、CVB5 混合感染 18 例(5.36%),CVA10、CVB5 混合感染 1 例(0.30%),CVA6、CVB5 混合感染1 例(0.30%),CVA6、CVA10 混合感染 16 例(4.76%),EV71、CVA16、CVB5 混合感染1例(0.30%)。2.E组、A组及B组三组间在性别构成、接触史及是否独生子女方面比较无统计学意义,三组病例发病年龄分布均集中在1-6岁,以1-3岁最多。3.E组发热时间及住院时间最长,B组发热热峰最高,A组院前病程最短。4.E组的肢体抖动、惊跳、呕吐、颈强直、巴氏征等神经系统受累症状出现最多,口腔疱疹发生率最低,B组多皮疹的体征出现最多。5.三组白细胞总数、中性粒细胞、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、C反应蛋白(CRP)均高于C组,淋巴细胞均低于C组,A组白细胞最高,B组的CRP最高。6.三组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、尿酸与C组比较差异无统计学意义,但B组尿酸升高比例最大;前白蛋白(PA)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌酐、尿素氮三组均低于C组,但三组间比较差异无统计学意义。7.三组CD3+细胞比例均低于C组,且差异有统计学意义。CD3+CD8+细胞、CD4+/CD8+细胞及CD3-CD19+细胞比例四组间比较差异无统计学意义。CD19+CD23+细胞比例在A组及B组均低于C组及E组,差异有统计学意义。CD3+CD4+细胞三组均低于C组,但只有E组与C组比较,差异有统计学意义,三组间两两比较差异无统计学意义。8.E组的IgA、IgM最高,且高于C组,B组的IgA、IgM最低,差异有统计学意义;IgG三组间及C组间比较差异无统计学意义。9.血糖在三组间及与C组比较差异无统计学意义,B组乳酸高于C组,差异有统计学意义,钾、钠、氯三组均在正常范围,钙离子方面,B组最低。结论:1.本研究采用半巢式RT-PCR技术及病毒细胞培养、分离技术检测手足口病住院患儿的咽拭子标本,鉴定肠道病毒型别,结果一致,实验方法可行,结果可信。2.苏州市2018年5-7月间手足口病病原以CVB5为主,其次为CVA6及CVA10,均超过EV71及CVA16,并存在少量混合感染病例。3.EV71手足口病患儿发热时间最长,皮疹少,口腔疱疹发生率最低,重症病例最多。CD3+细胞、CD3+CD4+细胞比例降低最明显,IgA及IgM最高,存在细胞免疫抑制,体液免疫亢进的情况。4.CVB5手足口病患儿发热热峰最高,皮疹最多,CRP、乳酸最高,IgA及IgM及钙离子最低,存在炎症反应重,细胞及体液免疫受抑情况。5.CVA16手足口病的临床表现最典型。