【摘 要】
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目的：探索健脾益气中药防治原发性肝癌的作用靶点。 方法：(1)选取10个健脾益气中药(方药组成为：黄芪、白术、茯苓、白芍、神曲、薏苡仁、法半夏)下调肝癌高表达的EST片段，采用
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目的：探索健脾益气中药防治原发性肝癌的作用靶点。
方法：(1)选取10个健脾益气中药(方药组成为：黄芪、白术、茯苓、白芍、神曲、薏苡仁、法半夏)下调肝癌高表达的EST片段，采用电子延伸与PCR结合方法，克隆出这些新基因的完整表达序列。(2)采用RNAi技术，初步检测这些新基因在肝癌增殖中可能的功能。
结果：(1)对10个候选的EST片段进行电子克隆，其中5个新基因得到了有效的延伸。(2)在电子克隆的基础上，进一步结合PCR、DNA测序等实验技术，获得了其中4个新基因cDNA完整表达序列，为进一步研究这些基因的生物学功能打下基础。(3)经进一步BLAST比对，证明其中一个基因已于2005年被国外某研究机构登录，其余3个新基因经蛋白阅读框架分析后完成GenBank登录，分别命名为：大鼠肝癌中健脾益气药物下调的基因ZX34、ZX36、ZX40，登录号分别为 DQ480743、DQ480774、DQ912022。(4)建立了RNAi技术检测基因功能的方法，观察到新基因ZX40沉默后，肝癌细胞形态学及增殖情况的变化，可能与健脾益气中药药效发挥有关。
结论：(1)本研究率先克隆并GenBank登录的3个新基因cDNA完整表达序列，对今后肝癌中药药理研究将有所帮助；(2)编号为ZX40可能与健脾益气中药的药效发挥有关。
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