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蛋黄不仅具有很高的营养价值,在医药保健方面也有着重要的作用,因此,近年来蛋黄含量高的鸡蛋越来越受到人们的青睐,如何提高鸡蛋中蛋黄含量逐渐成为研究的热点和重点。通过增加鸡蛋形成过程中蛋黄的沉积量可以提高蛋黄含量。卵黄的形成是由卵泡膜上极低密度脂蛋白受体(very low dens-ity lipoprotein receptor,VLDLR)蛋白介导的胞吞转运过程。VLDLR对于蛋黄的主要成分卵黄蛋白原(vitellogenesis,VTG)和极低密度脂蛋白(VLDL)的转运过程及其在卵黄膜上的沉积过程起着非常重要的作用。在VLDL转运蛋黄主要成分的胞吞过程中,组织蛋白酶D(CathepsinD, CTSD)是转运过程的关键酶。因此,本课题研究VLDLR和CTSD基因对鸡蛋蛋黄沉积作用的影响。本研究采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法,检测VLDLR基因和CTSD基因在山东地方鸡种汶上芦花鸡、济宁百日鸡和莱芜黑鸡中的多态性,并分析各多态位点不同基因型与4个蛋黄性状的相关性。研究结果如下:(1)VLDLR基因的SNPs检测及其与鸡蛋蛋黄性状的关联分析:在3个供试群体中共检测到2个具有生物学意义的SNP位点,即第6外显子8467nt处的G→A突变(V8467)和第17内含子13876nt处的A→G突变(V13876)。最小二乘分析结果表明,V8467和V13876两处SNPs位点对蛋黄重均有极显著影响(P<0.01),对蛋黄高度有显著影响(P<0.05),此外V13876对蛋黄高度也有显著影响(P<0.05);其中,V8467位点的BB基因型个体和V13876位点的AA基因型个体在蛋黄沉积作用方面具有较大优势,而其他基因型不利于提高蛋黄比例。双倍型对蛋黄重、蛋黄比率均达到极显著水平(P<0.01),对蛋黄高度达到显著水平(P<0.05)。(2)CTSD基因的SNPs检测及其与鸡蛋蛋黄性状的关联分析:在3个供试群体中共检测到2个SNPs位点,分别在第3外显子2614nt处C→T突变(CTSD3)和第4内含子5274nt处G→T突变(CTSD5274)。最小二乘分析表明,exon3和intron4两处SNPs位点对蛋黄重均存在极显著性影响(P<0.01);exon3处不同基因型的蛋黄高度还存在显著性差异(P<0.05),inton4处不同基因型的蛋黄比率存在显著性差异(P<0.05),蛋黄高度存在极显著性差异(P<0.01)。其中,两个位点的AB基因型个体在蛋黄沉积作用方面具有较大优势。双倍型对蛋黄重、蛋黄比率和蛋黄高度均达到极显著水平(P<0.01)。综合来看, VLDLR基因的编码区8467位点和非编码区13876位点SNPs以及CTSD基因的编码区2614位点和非编码区5274位点SNPs对鸡蛋蛋黄的沉积过程具有显著效应。