【摘 要】
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人angiostatin(h-angiostatin)是近年发现的新生血管生成抑制因子这一.它能够特异抑制血管内皮细胞的增生和迁移,亦能抑制多种肿瘤的生长与转移.人Angiostatin是人纤溶酶原（hu
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人angiostatin(h-angiostatin)是近年发现的新生血管生成抑制因子这一.它能够特异抑制血管内皮细胞的增生和迁移<[1,2]>,亦能抑制多种肿瘤的生长与转移.人Angiostatin是人纤溶酶原（human plasminogen,hplg）N-末端降解片段,相当于hplg N-末端4个K区（K1-4）,其抑制活性存在于K1-3区.在hplgN-末端共有5个丝氨酸蛋白酶的典型kringle结构域（K1-K5）,每一K区大约由80个氨基酸组成;含3对二硫键,稳定K区结构;各K区氨基酸同源性在50﹪左右.除K4外,共它K区都能特异抑制bFGF介导的牛毛细血管内皮（bovine capillary endothelial,BCE)细胞的增殖,其中K5区抑制作用最强,为了进一步分析K区的生物学活性,我们利用同源建模的方法,结合基因工程技术,研制了重组K4K5（rh-K4K5）并研究rh-K4K5对新生血管生成的抑制作用.鉴于hglg K区对内皮细胞增殖,新生血管生成有抑制作用,我们通过计算机模拟,设计了K4K5分子,并应用PCR方法,扩增了人纤溶酶原K4K5cDNA基因,与分泌型酵母表达质粒重组后,转化甲醇营养型酵母Pichia pastoris,获得了高效表达K4K5 cDNA的多拷贝转化子AH10.
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