【摘 要】
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【目的】目前,内分泌治疗和局部放疗仍然是治疗Luminal A型乳腺癌患者的主要手段。但在长期治疗过程中逐渐出现药物耐药和远处转移等现象。一些研究表明上述现象的发生可能与
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【目的】目前,内分泌治疗和局部放疗仍然是治疗Luminal A型乳腺癌患者的主要手段。但在长期治疗过程中逐渐出现药物耐药和远处转移等现象。一些研究表明上述现象的发生可能与人表皮生长因子受体-3(HER3)的高表达有关。本研究的目的在于阐明HER3在放疗抵抗中的作用,并进一步评估HER3是否能够成为放疗增敏的潜在靶点。【方法】我们用慢病毒介导的短发夹RNA(sh RNA)构建稳定低表达HER3蛋白的Luminal A型乳腺癌细胞株sh-HER3-MCF-7和sh-HER3-ZR75-1。CCK-8实验用于分析各组乳腺癌细胞的增殖能力。克隆形成实验用于检测各组乳腺癌细胞的放疗敏感性的差异。流式细胞仪用于检测各组乳腺癌细胞的细胞周期和细胞凋亡。免疫荧光实验用于检测各组乳腺癌细胞核内γH2AX灶的数目。细胞划痕和Transwell实验用于检测各组乳腺癌细胞的迁移、侵袭能力。蛋白免疫印迹实验(Western blot)用于检测各组乳腺癌细胞相关蛋白的表达变化。裸鼠移植瘤模型用于观察整体水平下,荷瘤鼠及移植瘤的生长。【结果】我们的研究发现,敲低HER3表达降低Luminal A型乳腺癌细胞的增殖能力,同时也降低辐照后的克隆形成能力,即敲低HER3表达增加Luminal A型乳腺癌细胞对放射治疗的敏感性。放疗增敏的机制可能是:敲低HER3表达增加辐照诱导的DNA损伤并降低修复能力。敲低HER3表达增加辐照诱导的细胞凋亡和G2/M期阻滞。敲低HER3表达抑制辐照诱导的细胞迁移、侵袭能力。同时在整体水平上,敲低HER3表达抑制了荷瘤鼠及移植瘤的生长,当联合辐照时,抑制效果更加明显。【结论】敲低HER3表达增加Luminal A型乳腺癌细胞对放射治疗的敏感性,HER3可能成为放疗增敏的的潜在靶点。
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