[目的]本研究采用来曲唑联合高脂饲料建立胰岛素抵抗多囊卵巢综合征(PCOS-IR)大鼠模型,从PI3K/AKT信号通路探讨电针干预对PCOS-IR模型大鼠的生殖内分泌及糖脂代谢的调节作用机制。[方法]1.将26只21日龄雌性SD大鼠分为空白对照组(8只)和PCOS-IR组(18只)。PCOS-IR组喂养45%高脂饲料16周,实验第3周起开始每日服用来曲唑直至造模结束,空白对照组同期常规饲料喂养。通过观察大鼠动情周期、卵巢及腹股沟脂肪组织学变化,比较体质量、脏器质量及脏器指数变化,测定血清睾酮和雌激素水平、糖耐量和胰岛素耐量试验、血脂水平、空腹胰岛素以及胰岛素敏感指数等指标确立PCOS-IR大鼠模型。成功建立PCOS-IR造模大鼠12只(成模率66.67%)。2.将成功制备的另外18只PCOS-IR大鼠随机分为电针组、二甲双胍组和模型组(每组n=6),设同期常规饲料喂养空白对照组(n=6),分别给予电针、二甲双胍(阳性对照)干预治疗2周后,观察各组大鼠发情周期、卵巢及腹股沟脂肪组织学变化,记录每周体质量、脏器质量及脏器指数变化,测定血清睾酮和雌激素水平、糖耐量试验、血脂水平、空腹胰岛素、胰岛素敏感指数及胰岛素抵抗指数。3.将成功制备的另外18只PCOS-IR大鼠随机分为电针组、二甲双胍组和模型组(每组n=6),设同期常规饲料喂养空白对照组(n=6),分别给予电针、二甲双胍(阳性对照)干预治疗2周后,收集各组大鼠未成熟卵母细胞行体外成熟培养,运用线粒体荧光探针技术检测各组大鼠成熟卵母细胞线粒体功能,观察各组大鼠卵母细胞的线粒体分布比例、线粒体膜电位、线粒体内活性氧含量变化情况。4.运用实时荧光定量PCR法、免疫组化和蛋白质印迹法检测空白对照组、模型组、电针组、二甲双胍组大鼠卵巢组织PI3K/AKT信号通路中IRS1、PI3K、AKT、GLUT4的m RNA和蛋白表达变化。[结果]1.PCOS-IR模型组大鼠体重及脏器湿重与空白对照组大鼠存在明显差异:PCOS-IR模型组大鼠第6周起体重显著高于空白对照组;PCOS-IR模型组大鼠腹股沟脂肪细胞直径及面积显著高于空白对照组;PCOS-IR模型组大鼠垂体、子宫重及垂体指数、子宫指数、卵巢指数、肾上腺指数显著小于空白对照组,而腹股沟脂肪重及指数显著大于空白对照组。2.PCOS-IR模型组大鼠生殖内分泌指标异常:PCOS-IR模型组大鼠表现出异常的动情周期,即持续处于动情间期,卵巢组织可见多个卵泡囊性扩张,颗粒细胞层变少,白膜增厚;血清睾酮水平明显升高,雌激素水平明显下降。3.PCOS-IR模型组大鼠代谢表型指标异常:PCOS-IR模型组大鼠糖耐量和胰岛素耐量异常,15 min、30 min、60 min、90 min、120 min血糖、空腹胰岛素及AUC显著升高,胰岛素敏感指数显著降低,胰岛素抵抗指数、甘油三酯及低密度脂蛋白水平显著升高。4.干预治疗后,与PCOS-IR模型组相比,电针组大鼠体重明显降低;子宫、垂体重量和指数以及卵巢指数均有显著增高;腹股沟脂肪细胞直径及面积变小;卵巢形态学也有改善明显,可见卵泡囊性变小,颗粒细胞层增加。干预作用与二甲双胍治疗组类似。5.干预治疗后,与PCOS-IR模型组相比,电针组大鼠血清睾酮水平显著下降、雌激素水平明显提高;电针组大鼠糖耐量试验中60 min及90 min血糖值、胰岛素抵抗指数均有显著降低,优于二甲双胍组。6.PCOS-IR模型大鼠卵母细胞线粒体膜电位显著低于对照组,干预治疗后,与PCOS-IR模型组相比,电针组大鼠卵母细胞线粒体膜电位值有升高趋势;PCOS-IR模型大鼠卵母细胞线粒体活性氧高于对照组,干预治疗后,电针组大鼠线粒体活性氧值则显著降低。7.PCOS-IR模型组卵巢组织IRS-1、PI3K、AKT和GLUT4 m RNA以及PI3K、AKT、GLUT4蛋白表达均显著低于对照组。干预治疗后,与PCOS-IR模型组相比,电针组大鼠卵巢组织IRS-1、GLUT4m RNA表达均有显著增高;同时电针组大鼠卵巢组织AKT、GLUT4蛋白表达均有显著增高;电针组大鼠卵巢组织PI3K、p-AKT蛋白表达也有升高趋势。电针组优于二甲双胍组。[结论]来曲唑联合45%高脂饲料可以建立有效的内分泌及代谢表型异常PCOS动物模型。电针干预可能是通过影响PI3K/AKT信号通路来改善胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征大鼠生殖内分泌及糖脂代谢表型,调节胰岛素抵抗多囊卵巢综合征大鼠卵母细胞线粒体功能。电针是改善胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征的一种较为有效的途径。