苹果品种及砧木脱毒和快繁体系建立

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苹果病毒病影响苹果树势、产量、品质,阻碍着中国苹果产业的发展。本研究以长富2号组培苗为试验材料,经过42℃16h光照/34℃8h黑暗下热处理,选取了在热处理28d、36d、44d、52d、58d后各取部分茎尖,在解剖镜下切取茎尖生长点,并对生长点进行培养、增殖扩繁。结果表明:随着热处理时间的增加,茎尖生长点的成活率越来越低,脱毒率越来越高;在热处理58d之后,茎尖生长点的成功检测到不含三种浅隐性病毒,苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)脱毒率为83.3%、苹果茎沟病毒(ASGV)脱毒率为66.7%、苹果茎痘病毒(ASPV)脱毒率为66.7%。通过以MS为基本培养基为基础,研究苹果品种玉华早富、烟富6号,苹果砧木MM116、T337四种材料离体培养方法,探讨不同品种及砧木的初代培养、继代培养、生根培养和炼苗移栽技术。结果表明:(1)在初代培养时,4种材料的离体新梢初代培养的最佳培养基均为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg+PVP500mg/L。附加500mg/LPVP处理,其新梢外植体的生长污染率、褐化率均显著低于其它处理浓度,相对应其成活率显著高于其它处理。(2)继代培养时,4个材料在附加0.5和0.6mg/L的6-BA时,继代培养的分化系数均显著高于其它低浓度处理。玉华早富、烟富6号两个品种的继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L,MM116、T337两个砧木的继代培养基为MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.1mg/L。(3)IBA处理浓度对苹果品种和砧木的生根影响均表现出随着IBA浓度的增加生根率呈先升高后下降的趋势。玉华早富最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.8mg/L,烟富6号最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L。MM116和T337两个砧木的生根培养基为1/2MS+IBA0.9mg/L。(4)用锯末做移栽基质,4种材料的移栽成活率均显著高于其它基质处理;此外,在相同的炼苗移栽基质条件下,砧木的移栽成活率显著大于品种。在T337外植体建立体系中,组培苗的玻璃化程度很高,严重影响了快繁体系建立。通过研究琼脂浓度、激素配比、NH4+和K+与NO3-离子浓度、光照因素,得出了更加适合T337组培苗扩繁的方法,即MS(NH4+0.75mg/L,K+2.2mg/L)+6-BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L(琼脂8g/L,光照2000lux)不但使组培苗保持了较高的扩繁系数还显著的降低了玻璃化的程度,有利于T337组培苗快繁体系的建立。
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