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目的: 1、研究NC和SN38对HT29细胞增殖的协同抑制作用，NC阻断SN38诱导的DNA损伤修复和引起DNA损伤。 2、探讨NC阻断DNA损伤修复的分子机制。 3、评价NC对HT29细胞增殖和凋亡的影响。 方法: 1、以人结直肠癌HT29细胞作为受试对象，通过NC和SN38联合用药，采用MTT和流式细胞实验检测细胞的增殖和凋亡变化，评价不同浓度的NC和SN38对HT29细胞增殖的协同抑制作用。 2、采用彗星实验检测NC和SN38对HT29细胞DNA损伤和修复情况，western blotting和免疫荧光实验检测细胞p-H2AX的蛋白表达。 3、以western blotting实验检测Eme1、p-Src(Tyr419)、Stat3、p-Stat3(Tyr705)、p-Stat3(Ser727)蛋白的表达，深入探讨NC引起DNA损伤和阻断SN38诱导的DNA损伤修复的分子机制。 4、以慢病毒载体成功建立稳定过表达Eme1的HT29细胞系，采用彗星实验检测NC和SN38对细胞DNA损伤和修复情况，western blotting实验检测NC对Eme1蛋白表达影响。 5、以CCK8和流式细胞实验评价不同浓度的NC对HT29细胞的生长和凋亡作用。 6、采用western blotting实验检测Cyt-c和caspase-3的蛋白表达，进一步探究NC诱导细胞凋亡的途径。 结果: 1、NC和SN38对HT29细胞的抑制率增大，并且促进HT29细胞凋亡，与单独SN38给药组相比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 2、彗星实验结果显示，SN38单独给药时，彗星尾长不明显;而当NC和SN38联合给药时，随着NC浓度的增大，彗星尾长和尾部DNA含量显著增大，与单独SN38给药组相比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western blotting和免疫荧光实验结果表明，NC和SN38联合给药时，p-H2AX蛋白表达水平均显著升高，与单独SN38给药组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。 3、Western blotting实验结果显示，SN38单独给药时，Eme1、p-Src(Tyr419)、Stat3、p-Stat3(Tyr705)、p-Stat3(Ser727)蛋白表达水平均显著升高，与溶剂对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05);而NC和SN38联合给药时，上述的五种蛋白水平均明显下降，与单独SN38给药组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 4、荧光显微镜下观察HT29细胞获得较高的转染效率，western blotting实验结果显示Eme1在HT29细胞中稳定表达。彗星实验结果表明，SN38单独给药时，彗星尾长不明显;而当NC给药时，彗星尾长和尾部DNA含量显著增大，与Eme1-OV组相比，差异具有统计学意义(P＜0.05)。Western blotting实验结果表明，NC下调了Eme1的蛋白表达水平。 5、与溶剂对照组比较，随着NC浓度增加，HT29细胞的抑制率逐渐增大，细胞凋亡率增大，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 6、Western blotting实验结果显示，Cyt-c和caspase-3蛋白表达水平均明显升高，与溶剂对照组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 1、NC和SN38对HT29细胞的增殖具有协同抑制作用，NC可以下调Eme1的蛋白表达，阻断DNA损伤修复，从而加重DNA损伤。 2、NC阻断DNA损伤修复途径可能与抑制Src-Stat3信号通路有关。 3、NC能够抑制HT29细胞的增殖，诱导HT29细胞凋亡，其分子机制可能与Cyt-c/caspase-3介导的线粒体内部凋亡途径有关。