槲皮素对乳腺癌血管生成、增殖和调亡的影响

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目的:研究槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其抗肿瘤作用的机理。方法:建立人乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠异种移植瘤动物模型。24只荷瘤鼠随机分为四组用药:A组(control);B组(Quercetin);C组(5-Fu);D组(5-Fu+Que)。用药15天,观察药物对各组肿瘤的抑制作用。乳腺癌标本用光镜、电镜观察,TUNEL法进行原位凋亡检测,MVD计数,采用免疫组化分析VEGF﹑MMP-9﹑Ki67﹑bcl-2的表达。结果:1.槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤具有抑制作用: A组裸鼠瘤重明显高于B组﹑C组、D组 ,A组与B组﹑A组与C组﹑A组与D组差异均有显著意义(P<0.05); B组﹑C组﹑D组抑瘤率为36.46%﹑38.01%﹑48.52%,D组高于B组、C组,但统计学分析B﹑C﹑D组间无显著性差异,表明联合用药未见明显抗肿瘤作用的增强。2.槲皮素对荷瘤鼠化疗毒性作用的影响:用药期间C组、D组裸鼠有精神不振、活动减少、厌食及消瘦表现。实验结束时,B组与A组比较,鼠重变化无显著性差异(P>0.05),C组﹑D组与A组﹑B组比较,鼠重明显降低,差异有显著性(P<0.01),D组与C组鼠重差异有显著性(P<0.05)。表明槲皮素对荷瘤鼠无明显化疗毒副作用,可缓解5-Fu的化疗毒副作用。3.Ki67免疫组化染色显示:Ki67标记指数,A组与B组﹑C组﹑D组有显著性差异(P<0.01),B组﹑C组﹑D组间无显著性差异,提示槲<WP=6>皮素有抑制乳腺癌细胞增殖的作用。4.原位凋亡检测显示:凋亡指数,A组与B组﹑C组﹑D组有显著性差异(P<0.01),D组与B组﹑C组有显著性差异(P<0.05);凋亡增殖比率,A组与B组﹑C组﹑D组有显著性差异,D组与B组﹑C组有显著性差异(P<0.05)。表明槲皮素可诱导乳腺癌细胞发生凋亡、抑制其增殖。5.bcl-2免疫组化显示:A组与B组﹑C组﹑D组差异有显著性(P<0.05)。表明槲皮素可下调乳腺癌细胞bcl-2蛋白的表达。6.MVD计数显示:以FⅧ-RA免疫组化染色标记肿瘤血管,行MVD计数,A组与B组﹑C组﹑D组的MVD有显著性差异(P<0.01),表明槲皮素有抑制乳腺癌血管生成的作用。7.MMP-9免疫组化染色显示:本实验各组移植瘤中MMP-9表达率低,A组与B组﹑C组﹑D组间差异无显著性(P>0.05),提示槲皮素对MMP-9表达无影响。8.VEGF免疫组化染色显示:A组与B﹑C﹑D组差异有显著性(P<0.01)。表明槲皮素可抑制乳腺癌VEGF的表达。结论:槲皮素对人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤有抑制其生长的作用。其机理可能与下列因素有关:抑制肿瘤细胞的增殖;诱导肿瘤细胞凋亡,与下调肿瘤细胞bcl-2表达有关;主要通过抑制血管内皮生长因子VEGF表达,从而阻抑肿瘤血管生成,促进肿瘤发生退缩。槲皮素无明显化疗毒副作用。
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