论文部分内容阅读
第一章卵巢早衰的不孕症患者临床特征的初步探讨目的探讨卵巢早衰的不孕症患者的临床特征、病因分型及特征，初步分析POF不孕症患者的内分泌特点，并探讨对其诊断治疗方法的情况。方法从病因分型、诊断、治疗方面回顾性总结、分析符合卵巢早衰诊断标准的不孕症妇女138例，并对其中45例患者的血清抑制素B和其他内分泌水平进行病例对照研究，初步分析INHB与其他生殖内分泌的相关性，并找寻其之间的函数规律。结果（1）在本组病例中有明显发病原因的有23例（16.67％），其中行其中行卵巢手术的3例，服用卵巢毒性药物或有毒物接触史的3例，曾感染过腮腺炎者4例，有全身或局部免疫性疾病患者2例，染色体核型异常的11例。本组患者除雌激素低落症状外，未发现明显的心脑血管疾病及其他重大的疾病。（2）原发闭经7例，继发闭经131例，原发不孕110例（79.71％），继发不孕28例（20.29％）。父母为近亲结婚的4例，家族出现不孕及早绝经或POF的共9例。所有患者均有情绪不稳定，疲乏，记忆力下降等症状，并有不同程度的生殖泌尿道萎缩、干燥等症状，并与病程长短和治疗与否和治疗时间长短有关。（3）POF不孕组均较对照组INHB吸光度、外推浓度、E2、PRL、To值低；较对照组FSH、LH高，差异具有显著性（p＜0.05）。（4）无论患者组还是对照组FSH与LH与INHB无相关性，患者组E2与INHB亦无相关性p＞0.05。对照组E2与INHB外推浓度统计处理后显示呈正相关（p＜0.05）。两组合并后，INHB分别与FSH与呈负相关（r=-0.748，p＜0.01），与LH呈负相关（r=-0.693，p＜0.01），与E2呈正相关（r=0.617，p＜0.01），相关性均有极显著意义。（5）FSH与INHB浓度相关性的观测值符合线性函数曲线，两者呈线性负相关。E2与INHB浓度符合线性函数曲线，两者呈正相关。LH与INHB浓度相关性的观测值更附合反函数曲线。（6）在给予人工周期后，所有患者雌激素低下的症状都得到了较好的改善，FSH较前有所下降，经统计学处理差异有显著性（p＜0.05），LH和E2较前也略有下降，经统计学处理差异无显著性（p＞0.05）。（7）在人工周期治疗中，已有2例患者未经促排已获妊娠。1例在人工周期FSH明显下降（但仍有40 IU／L以上）后采用HMG／HCG后单胎妊娠。本组总妊娠率为2.17％（3／138）。结论（1）POF不孕症患者基本发育及状况良好，适宜助孕和妊娠。（2）遗传因素是POF不孕症重要的发病原因，有必要对其进行遗传筛查。（3）POF不孕症内分泌失调包括雄激素缺乏，INHB可作为反应POF内分泌失调的辅助检查。（4）雌激素替代可改善POF不孕症失调的内分泌环境。（5）POF不孕症患者自然妊娠率较低，需借助其他辅助生育手段。第二章核型分析在POF不孕患者中的探讨目的探讨POF不孕症患者中染色体异常的发生率及具体核型分布，初步探讨染色体异常的位点与POF发病的关系。方法用G-分带技术对65例POF不孕症患者进行检测，检测结果光镜观察后扫描记录核型分析图像。结果（1）65例POF不孕症患者中染色体正常者（46，XX）54例，占83.08％；染色体核型异常者共11例，占16.92％。其中单纯X染色体异常的有9例，单纯常染色体异常者1例，X染色体与常染色体平衡易位者1例。（2）核型异常的分别是45，XO的3例；嵌合型2例45，XO／46，XX；X单体与三体嵌合型l例45，XO／47，XXX；X短臂等臂嵌合型45，X／46，X，i（Xp）1例；X环状染色体嵌合型45，X／46，X，r（x）（p22-q25）1例；X染色体长臂微缺失46，XX，del（X）q（25）1例；X与14号染色体易位46，XX，t（X；14）（q22，q23）1例；13号与14号染色体易位45，XX，-13，-14，t（13，14）1例。（3）4例患者发生X染色体的断裂、重排或缺失。断裂点主要集中在Xq22-Xq25。结论（1）POF不孕症中染色体异常比例较高，对所有卵巢早衰患者行染色体检查很有必要。（2）X染色体异常在POF染色体异常占较大的比例，引起卵巢功能失调的部位主要集中在X染色体长臂上。（3）有必要结合现代分子生物学技术对POF不孕症染色体细微异常检测。第三章BMP15基因外显子突变与多态研究与POF不孕症的关联性研究目的分析BMP15基因外显子突变及多态与中国POF不孕症患者发病的关联性方法对92例POF不孕症患者和76例同年龄对照组的BMP15基因蛋白编码区用直接测序的方法进行分析。同时将两组的临床特征进行分析比较。结果（1）在POF不孕组与对照组中均未发现BMP15基因两个外显子的突变。（2）POF不孕组与对照组在位于第1外显子5’-UTR的SNP rs（3810682 C→G：ss16336587）的基因频率上比较无统计学差异（p＞0.05）。（3）位于BMP15基因第2外显子蛋白编码区SNPrs17003221（C→T）的基因频率上比较无统计学差异（p＞0.05）。（4）该组所研究的中国汉族人群中在POF不孕组（C／G：97.8％／2.2％）及对照组（C／G：98.0％／2.0％）中等位基因C的频率远大于等位基因G的频率，与文献报道相反。（5）内分泌FSH、LH、To、E2 POF不孕组与对照组比较结果同第一章，POF不孕组与对照组的PRL比较无统计学差异（p＞0.05）。结论（1）在中国汉族人群中BMP15基因外显子的突变非常少见，与POF不孕症发病不相关。（2）SNP rs（3810682 C→G：ss16336587）与SNP rs17003221（C→T）多态与POF不孕症发病不相关。（3）SNP基因频率在不同人种间有较大变异。（4）POF不孕症中PRL值的变化尚不确定。第四章FMR1基因5’-UTR（CGG）n重复次数与卵巢早衰不孕症的相关性研究目的FMR1基因5’-UTR（CGG）n重复次数分析与中国POF不孕症患者发病的关联性方法对92例POF不孕症患者和76例同年龄对照组的FMR1基因5’-UTR（CGG）n重复次数采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行粗略筛查，并用荧光PCR／毛细管电泳进行验证。结果（1）PAGE胶显示POF不孕组与对照组在（CGG）n重复次数＜18次、18～35次、36～52次、＞52次四个组段的构成比无统计学差异（x2=5.3526，p＞0.05）；POF不孕症组在重复次数多于36次的患者比例多于对照组，差异具有显著性（p＜0.05）。（2）POF不孕组与对照组FMR1基因CGG等位基因频率构成有差异，最大等位基因频率为n=26。（3）中国汉族POF不孕症中FMR1基因CGG重复序列的前突变与其发病无相关性，但POF不孕组较对照组CGG重复次数多，差异具有显著性（p＜0.05）。（4）POF不孕组FMR1基因CGG重复次数与患者未用药出现闭经年龄和血清FSH无相关性（p＞0.05）。结论（1）荧光PCR技术对POF患者进行FMR1基因5’-UTR（CGG）n重复次数的筛查经济、简便、准确。（2）FMR1前突变与POF不孕症发病无相关，但POF不孕组CGG重复次数较对照组多，但均在正常范围内，发病机理和CGG重复次数突变在不同人群中需重新化分。（3）对POF不孕症患者进行FMR1基因筛查是有必要的，以及必要的具体的基因分析和家系调查。总结本研究通过POF不孕症临床及相关基础研究，初步探讨了POF不孕症的临床特点及相关候选基因的关联情况，对POF不孕症临床特征、核型特点、BMP15基因与组的FMR1基因多态等进行了研究。结果表明：（1） POF不孕症患者基本发育及状况良好，适宜助孕和妊娠。（2）遗传因素是POF不孕症重要的发病原因，其中染色体异常比例较高（16.92％），有必要对其进行卵巢早衰患者行染色体检查包括在内的遗传筛查。（3） POF不孕症内分泌失调包括雄激素缺乏，INHB可作为反应POF内分泌失调的辅助检查。（4）雌激素替代可改善POF不孕症失调的内分泌环境。（5） POF不孕症患者自然妊娠率较低，需借助其他辅助生育手段。（6） X染色体异常在POF染色体异常占较大的比例，引起卵巢功能失调的部位主要集中在X染色体长臂上。（7）在中国汉族人群中BMP15基因外显子的突变非常少见，与POF不孕症发病不相关。SNP rs（3810682 C→G：ss16336587）与SNP rs17003221（C→T）多态与POF不孕症发病不相关。SNP基因频率在不同人种间有较大变异。（8）用荧光PCR技术对POF患者进行FMR1基因5’-UTR（CGG）n重复次数的筛查经济简便准确的方法。（9） FMR1前突变与POF不孕症发病无相关，但POF不孕组CGG重复次数较对照组多，但均在正常范围内，发病机理和CGG重复次数突变在不同人群中需重新化分。（10）对POF不孕症患者进行FMR1基因筛查是有必要的，以及必要的具体的基因分析和家系调查。