衰老是生命的自然过程，衰老机体表现为对外界刺激因子的适应能力降低，患感染性疾病和肿瘤的机会增加。以上事实主要归因于随机体衰老，免疫功能出现进行性下降，即免疫系统老化或免疫衰老，尤其是T细胞功能出现严重缺陷。免疫机能受损后，又会导致机体容易出现多种疾病，加速衰老的进程，严重影响老年人的健康。研究免疫衰老的分子机制及延缓免疫衰老的方法，对健康地渡过老年阶段有重要意义。 祖国医学认为，衰老与机体肾中精气的虚衰有关，温补肾虚的中药可减缓衰老的进程。通过生理学和生物化学研究表明，补肾药可通过调节内分泌、免疫及生殖系统的功能来延缓衰老。 衰老模型是研究延缓衰老方法及其作用机制的关键一环，直接关系到实验结果的实际意义。本研究选用20月龄的老龄小鼠作为自然衰老模型，同时给10月龄(接近衰老)小鼠注射醋酸可的松，造成小鼠，肾虚，作为“肾虚致衰老”模型。 金匮肾气方为我国传统补肾方药，该方滋补肾虚、延缓衰老的作用已被世人所公认。人参和黄芪足很好的补气药，同时还具有促进淋巴细胞增殖和提高细胞因子IL-2活性的作用。在补肾药中加入适量的人参和黄芪，可更好地增强其补肾效果，把该方定名为益气补肾方药(strengthening vital energy combined with tonifying kidney，SVE plusTK)。 与衰老有关的免疫功能变化，主要由T细胞功能的改变所致。T细胞功能的改变可能归因于多种综合因素的异常：T细胞增殖、细胞因子的产生、黏附分子的表达、参与调控多种免疫分子表达的转录因子NF-κB的活性及激活诱导的T细胞凋亡等。 基于上述观点，本研究用自然衰老小鼠和醋酸可的松致肾虚小鼠 中文摘要为模型，在整体水平，从淋巴细胞增殖、细胞因子和虱附分子基因表达、T细胞 NF－K B活性、T细胞激活诱导的 T细胞凋亡等方面探讨了自然衰老和“肾虚致衰老”的免疫学机制，同时，观察并比较了益气、补肾及益气补肾方药对免疫系统老化的防治作用。目的是系统地探讨传统中药复方延缓衰老的免疫学机制。 同时，以公认的人胚肺成纤维细胞为衰老模型，在细胞水平观察了人参的主要成分人参皂贰对细胞增殖活性的调节及作用机制，进一步证实人参皂贰抗细胞衰老作用，并为益气方药可提高补肾药的作用提出可靠的证据c研究分以下儿个部分：回 益气补肾方药调节老龄和肾虚小鼠淋巴细胞增殖、细胞因子IL－2和ILl 基因表达的研究 给自然衰老和肾虚小鼠灌服益气、补肾和益气补肾方药，经MTT法观察了不同方药对脾脏淋巴细胞增殖的影响；用胸腺细胞增殖法检测了ConA诱导的脾脏淋巴细胞几七活性水平；用ELISA方法测定了脾脏淋巴细胞经ConA、CD3抗体及LPS诱导的几、 水平；同时用RT干CR的方法观察了脾脏淋巴细胞经 ConA刺激后，细胞因子 IL七和I［－12 mR＼A的表达，结果如下：1．1 老龄个鼠脾淋巴细胞经ConA、CD3抗体和 LPS刺激后，增殖主数明显低 于低 齿＊鼠（p＜0＊ 1）；L－2活性也明显降低（p＜0＊引。同时经ELISA方5去还观察到，ConA及CD3抗体刺激的老龄小鼠脾脏淋巴细胞ILl 的产生明显减少k＊．of），而LPS刺激的各组，ILd2的水平差异不显著。另外，老龄小鼠的几上和 IL＊。RNA表达也比低龄小鼠分别下降45％禾 42％。 给老龄小鼠灌服益气、补肾及益气补肾方药后，淋巳细胞增殖指数明显增加一＜0．05或 p＜0刀 1人其中补肾和益气补肾方药对 ConA诱导的细胞增殖的促进作用显著高于益气方药中＜0刀5卜三种方药都能显著增加老龄小鼠ConA诱导的脾脏淋巴细胞IL上的活性及ConA或 CD3抗体诱导的 ILl 2的水平巾＜0刀5或 p＜0刀 1），其中，益气补肾方药与益气和补肾方药比有显著性差异（均p＜0刀引。问时，三种方药对IL－2的mRNA表达分别提高19％、67％和 105％；对n－12的mRNA表达也有促进作用，分别提高 69％、94％和 105％。 中文摘要 1．2 肾虚小鼠脾淋巴细胞增殖能力、k 活性及 IL八 2产生水平均明 显比低龄小鼠下降巾＜0刀1或 p＜0刀5人 IL上 mRNA也比对照降低 24％。 三种方药均可改善LPS刺激的肾虚小鼠脾淋巴细胞增殖低下的状 态，且三种方药的作用没有显著性差异。益气补肾方药对CD3抗体 刺激的脾淋巴细胞的增殖促进作用最明显，与其它方药有显著差异 O＜0刀5卜 益气和益气补肾方药还能明显提高肾虚小鼠脾脏IL＜的活 性水平巾＜0．05人 二者的作用无显著性差异。另外，三种方药均可不 同程度地提高 ConA及 CD3抗休刺激的肾虚小鼠脾脏淋巴细胞 ILIZ 的产生，只有益气补肾方药的作用最显著巾功刀引。 同时，还观察到，三种方药对 IL2 mRNA的表达可分别提高 60％、 100％和 74％。 以上结果提示：从免疫衰老的角度来看，自然衰老和肾虚模型小