溃疡性结肠炎是常见的胃肠道疾病,主要特点为发病率高、难以根治和易反复发作,研究表明其病因与环境变化、肠道微生物群失衡和免疫功能障碍等因素有关。活的益生菌具有维持肠道微生物平衡、改善机体免疫功能和预防溃疡性结肠炎的功能,然而灭活菌及其发酵制品是否对溃疡性结肠炎具有益生功能及其作用机制尚有待研究。本研究用葡聚糖硫酸钠诱导小鼠建立溃疡性结肠炎模型,探讨灭活乳双歧杆菌U9发酵乳对小鼠紧密连接蛋白、炎症因子及肠道菌群的影响,评价灭活U9对溃疡性结肠炎的预防作用,为灭活益生菌发酵制品的研发和应用、溃疡性结肠炎的缓解和治疗提供理论指导。40只8周龄野生型雄性小鼠,随机分为对照组、模型组、灭活U9低剂量组、灭活U9高剂量组。对照组在试验期间（14天）灌胃生理盐水;0-7天,模型组灌胃生理盐水,灭活U9低剂量组、灭活U9高剂量组分别灌胃含U9浓度为1.6×109 CFU/m L、8.0×109 CFU/m L的灭活菌发酵乳,灌胃剂量为0.1m L;8-14天,模型组灌胃生理盐水的同时自由饮用2.5%（w/v）葡聚糖硫酸钠溶液,U9低剂量组、U9高剂量组灌胃相应浓度发酵乳的同时饮用葡聚糖硫酸钠溶液。造模结束后,检测小鼠疾病活动指数、炎症因子水平、紧密连接蛋白表达和肠道微生物组成等。结果表明,对照组小鼠体重在造模期间持续增加,小鼠处于健康状态;其余三组小鼠体重在造模前3天增加,从第4天开始下降,且灭活U9组下降幅度小于模型组。模型组疾病活动指数与对照组比显著升高（P<0.05）,小鼠造模成功;灌胃灭活U9发酵乳组评分显著低于模型组（P<0.05）。与模型组比,灭活U9组结肠长度显著增加（P<0.05）,结肠组织病理学评分显著降低（P<0.05）,且高剂量组两者均恢复到正常组水平。此外,灭活U9组结肠促炎因子（TNF-α、IFN-γ、IL-6）表达下降,抗炎因子（IL-4、IL-10）表达量及紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin、E-cadherin）在m RNA水平的表达均升高,免疫组化显色加深且评分升高。肠道菌群多样性分析显示,高低剂量U9组Alpha多样性指数Shannon、Ace、Chao升高,Simpson降低,PCo A结果中微生物组成与模型组存在差异,说明肠道菌群多样性和丰富度均高于模型组。灭活U9发酵乳干预后Firmicutes、Cyanobacteria、Verrucomicrobia、Deferribacteres的相对丰度增加,Bacteroidetes、Tenericutes的相对丰度降低;此外,U9有效增加了肠道中有益菌（Ruminococcaceae＿UCG-014、Prevotellaceae＿UCG-001、Lactobacillus）,降低了有害菌（Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、Erysipelatoclostridium）。相关性分析结果显示Roseburia、Prevotellaceae＿UCG-001、Muribaculum与抗炎因子正相关,与促炎因子负相关;Erysipelatoclostridium、unclassified＿o＿＿Bacteroidales、Bacteroides、Helicobacter与抗炎因子负相关,与促炎因子正相关。综上所述,灭活乳双歧杆菌U9发酵乳通过上调紧密连接蛋白、抑制炎症反应、调节肠道菌群达到预防溃疡性结肠炎的目标。