流体室运动模拟装置下骨髓瘤细胞对骨细胞及RANKL表达的影响

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目的:本研究建立流体室运动模拟装置检测骨髓瘤细胞对小鼠正常骨细胞的影响及对骨细胞RANKL蛋白表达的影响。方法:体外传代培养骨髓瘤细胞株U266和小鼠骨细胞株Y4;体室运动模拟装置(FLOW FLUID CHAMBER)为多伦多大学机械工程学实验室研发。显微镜下观察骨细胞数量及形态;ELISA方法检测各组细胞中的RANKL的浓度。实验分组及模式:A组(骨细胞标准培养液)和B组(瘤细胞上清液),每组置入流体室(FLOW FLUID CHAMBER)装置分别设流动和非流动模式。结果:采用U266上清液培养的Y4细胞较标准培养液培养的Y4细胞在数量上明显减少,形态发生多形性改变,经过流动装置后,B组流动模式下细胞数量较非流动模式增多,细胞变形也较少;A组细胞培养液中RANKL较B组少(P<0.05),且流动模式下两组上清液中RANKL均较非流动模式少(P<0.05)。B组TRAP染色结果阳性的破骨细胞分化数量较A组多(P<0.05),且流动模式下两组上清液分化破骨细胞的数量均较非流动模式少(P<0.05)结论:结果提示骨髓瘤细胞可致正常骨细胞减少,引起骨髓瘤骨病。受骨髓瘤细胞影响,骨细胞可高表达RANKL,刺激破骨细胞分化增多。流体动力可以降低骨细胞RANKL的表达,从而减少骨破坏。
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