目的:本研究通过检测转染THP-1细胞构建的过表达CD40L基因急性髓系白血病NOD-SCID小鼠模型髓外器官心脏、肾脏中CD13、MMP-2、VEGF的表达情况,探索CD40L过表达对急性髓系白血病髓外心、肾浸润的影响。方法:1)NOD-SCID小鼠经尾静脉注射THP-1细胞、转染空载体的THP-1细胞株及转染CD40L基因的THP-1细胞株各1×10~7/只,构建急性髓系白血病NOD-SCID小鼠模型,本课题组已成功筛选过表达CD40L的THP-1稳定细胞株;将上述小鼠分为三组:THP-1组、空载体转染THP-1组、CD40L转染THP-1组,每组8只小鼠;2)检测各组小鼠的血常规、外周血涂片及骨髓形态学检查;3)选取各组成瘤小鼠,剥离小鼠心脏、肾脏,用4%甲醛固定后石蜡包埋、切片,行HE染色,显微镜下观察急性髓系白血病小鼠的髓外心、肾浸润情况;4)采用免疫组化检测小鼠心脏、肾脏中CD13、MMP-2、VEGF的表达情况。结果:(1)过表达CD40L的THP-1稳定细胞株:镜下见稳定GFP荧光表达,本课题组前期已用PCR法验证CD40L在THP-1细胞株中过表达;(2)THP-1组、空转组、CD40L组三组小鼠实验前与建模后第4周外周血中均呈现白细胞增多,血红蛋白及血小板减少;各组之间三种血细胞比较无明显趋势变化。(3)THP-1组小鼠在外周血涂片及骨髓涂片中均找见THP-1细胞的有7只,空转组和CD40L组分别有6只。(4)三组小鼠心脏、肾脏组织切片HE染色结果:THP-1组小鼠出现心脏浸润和肾脏浸润均有4只,空转组有2只出现心脏浸润、6只出现肾脏浸润,CD40L组各有3只出现心脏、肾脏浸润。(5)IHC法检测三种小鼠心脏、肾脏中CD13、MMP2、VEGF表达情况:CD13在所有小鼠的心脏、肾脏中均为阳性表达;CD40L组小鼠中心脏的MMP-2表达量低于空转组及THP-1组,差异有统计学意义(p<0.05);CD40L组小鼠中肾脏的MMP-2表达量低于空转组及THP-1组,CD40L组与THP-1组比较,差异有统计学意义(p<0.05),CD40L组与空转组比较,差异无统计学意义(p>0.05);CD40L组小鼠心脏中VEGF的表达量低于空转组及THP-1组,其差异具有统计学意义(p<0.05),而肾脏中的表达亦低于另两组,但其差异无统计学意义(p>0.05)。结论:(1)小鼠急性髓系白血病模型建模后外周血WBC升高、HB及PLT下降;(2)通过检测急性髓系白血病小鼠髓外心、肾组织的HE染色及CD13表达情况,发现急性髓系白血病易出现髓外心、肾浸润;(3)过表达CD40L基因的白血病小鼠髓外心、肾组织中MMP-2、VEGF的表达量较非过表达CD40L基因的白血病小鼠低,提示过表达CD40L基因可能影响白血病小鼠的髓外心、肾组织浸润程度,其具体机制有待进一步研究。