激光诱变适于制备生物柴油的小球藻的研究

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人口不断增长,工业不断进步,全球能源急剧紧缺,地球上的化石能源储存是有限的,按照目前的消耗速度终有一天化石能源会被消耗殆尽,届时,人类社会的发展会受到限制。而解决这一问题的方法在于开发寻找到一种新型可实际应用的能源,这一课题已经迫在眉睫。诱变育种以其效率高,成本低,简单实用的特性得到广泛的关注。本文主要通过对9号小球藻、31号小球藻和海水小球藻使用He-Ne(氦氖)激光、Nd:YAG(倍频雅阁)激光和半导体激光进行诱变处理,测定不同处理组的油脂产率,从而筛选出高产油脂突变藻株,共18株。对筛选出的高产藻株进行继代培养,进行油脂产率的研究,结果表明9号小球藻Nd:YAG激光8min处理组,31号小球藻He-Ne激光4min处理组和Nd:YAG激光12min处理组,海水小球藻Nd:YAG激光4min处理组油脂产率高于对照组;同时对这四个处理组进行硝酸还原酶活力和乙酰辅酶A羧化酶的测定,除了31号小球藻He-Ne激光4min处理组两种酶活则略低于对照组,其余三种高产藻株均高于对照组。因此可以初步判断,激光引发的突变未直接影响31号小球藻He-Ne激光4min处理组的两种酶,而对于其他三种藻株的两种酶则产生了直接影响。然后本实验选取了几种在油脂合成途径上具有关键作用的7种基因进行研究,分别是BC(生物素羧化酶)、FATA(脂酰ACP硫解酶)、ACP(酰基载体蛋白)、SAD(硬脂酰ACP去饱和酶)、MCTK(丙二酸单酰-COA-ACP转酰酶)、FAD(ω-3脂肪酸去饱和酶)、KAS基因(β-酮脂酰-ACP合酶)。9号小球藻Nd:YAG激光8min处理组,31号小球藻He-Ne激光4min处理组和Nd:YAG激光12min处理组,海水小球藻Nd:YAG激光4min处理组7种基因表达量明显超过对照组,对比油脂产率可以发现这7种基因对油脂产率有直接的影响。共筛选出4株能够稳定遗传高产油率的突变藻株分别是9号小球藻Nd:YAG激光处理8min,31号小球藻He-Ne激光处理4min,Nd:YAG激光处理12min和海水小球藻Nd:YAG激光处理4min。为诱变育种研究提供一种思路,也为清洁能源的研究提供参考。
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