前言 头颈鳞癌中的口咽、下咽及声门上喉癌侵袭性强、转移率高、预后差。在综合治疗的研究热点中发现，不同患者的治疗反应及预后有差异。如何评估外科手术、抗癌药物及放射治疗对预后的影响，目前尚缺乏完整的科学依据。需要进一步探索肿瘤的某些特殊生物学改变和机理，确定出危险状态下的病人，以便对其进行积极治疗。 本实验以口咽、下咽及声门上喉癌病例为资料，通过免疫组化技术检测突变型P53、Bcl-2及P-gp蛋白在这些癌中的表达，并结合多种预后相关因素进行综合分析，探讨该三项分子生物学指标对预后及术后放疗或化疗敏感性预测方面的作用，为临床选择科学适宜的治疗方案提供依据。 实验材料与方法 随机选择我院1998年-2001年间头颈鳞癌住院病例63例，其中口咽癌11例、下咽癌21例、声门上喉癌31例。男53例，女10例，年龄32岁-74岁，平均年龄58.9岁。全部病例术前均未经放射或抗癌药物治疗，外科治疗术式基本相同，经术后病理证实为鳞状细胞癌。病例分单纯手术组25例，术后放疗或化疗组38例，有完整的临床治疗和随访资料。随访至2003年3月，随访最短时间5个月，最长时间62个月，随访率95.2％。 将选取的63例头颈鳞癌存档蜡块切成5μm组织切片，分P53、Bcl-2及P-gp三组。采用链霉素抗生物过氧化物酶法(简称S-P法)检测P53、Bcl-2及P-gp蛋白在口咽、下咽及声门上喉癌中的表达，阴性对照采用PBS代替一抗。免疫组化结果判定：P53蛋白位于细胞核，呈棕黄色颗粒为阳性，Bcl-2和P-gp蛋白位于胞浆或胞膜呈棕黄色颗粒为阳性。切片计数10个高倍视野，阳性细胞＜10％为阴性(-)，10％-50％为阳性(+)，＞50％为强阳性(++)。病理组织学和TNM分类：参照UICC1987年PTNM标准进行病理分级(G)和分期(Seage)。统计方法采用SPSS11.0软件进行χ~2检验、Log-rank检验、Logistie回归及Cox模型分析。实验结果 本实验63例口咽、下咽及声门上喉癌男性发病占88.3%，颈淋巴结转移率为57.1%，巧3、Bcl一及P一gP蛋白阳性表达分别为71.4%，47.6%和42.9%，综合治疗占60.3%(38/63)。 1.在治疗方法与生存结果的单因素分析中，手术组的生存或死亡复发病例与术后放或化疗组结果对比无差异(P二0.051)。Cox模型多因素分析中也未显示相关性(P二0.752)。提示治疗方法不是影响预后的主要因素。 2.单纯手术组和术后放疗或化疗组的组内分析结果:手术组巧3阳性与阴性间的生存率差异有显著性(P二0.029)，三年累计生存率分别为40.6%和100%。在术后放疗或化疗组巧3、Bcl一和P一gP阳性与阴性病例的生存率对比有差异(p<0.05)，阳性三年生存率分别为20.5%、22.2%和11.5%、阴性三年生存率分别为65.2%、50.0%和53.5%。但手术组与术后放疗或化疗组的组间对比三年生存率无差异(P> 0.05)，提示突变型P53、Bd一及P一gP蛋白表达可能是抵抗放疗或化疗的生物学指标，在敏感性预测方面具有潜在价值。 3、在预后因素的Cox模型分析中，P53、P一gP蛋白表达与预后有关(P二0.031和P二0.001)。此外，预后还与临床分期有关(P二0.045)，说明突变型P53、P一gP蛋白阳性表达及临床分期是影响口咽、下咽及声门上喉癌预后的独立指标。 4、在各因素与颈淋巴结转移的单因素分析中，颈淋巴结转移与Bd-2相关，P值为0.009;多因素分析中P值为0.011。Bcl一阳性表达例颈淋巴结转移为76.7%，但T和病理分级与颈淋巴结转移无关。说明Bcl一对颈淋巴结转移有较大影响，肿瘤的生物学特性可能比肿瘤病灶的大小更相关。结论1、突变型P53、Bd一及P一gP蛋白表达是抵抗放疗或化疗的生物学指标，在敏感性预测方面有一定作用。2、突变型P53、P一gP蛋白表达及临床分期是影响预后的独立指标。3、颈淋巴结转移与Bd一蛋白表达有关，提示口咽、下咽及声门上喉癌早期淋巴结转移、转移率高的特性可能与凋亡抑制基因Bcl-2过表达有关，但它在肿瘤转移方面的机制还不清楚，需进一步研究。